菊花遗传转化受体系统的研究.pdfVIP

维普资讯 http://... 雹 曩囡 囝嘲 学报自然科学版, 菊花遗传转化受体系统的研究 吕晋慧 。,孙明 ,吴月亮 ,孙磊 ,张启翔.山西农业大学林学院,山西太谷 ; .北京林业大学园林学院,北京摘 要:挥讨了不同抗生素对菊花品种 “玉人面”叶片不定芽分化和无茵苗生长的影响.并对羧卞青霉素、头孢霉 素的押茵效果及茵株 、 对菊花的侵染性进行了研究.建立了“玉人面 的遗传转化受体系统。结 果表明:叶片不定芽再生、无茵苗生根筛选的抗生素和临界耐受浓度分别为/ 的、 / 的卡那霉 素; / 的抑茵抗生素不影响叶片外植体不定芽再生。两种抑茼抗生素均影响菊花苗的生长。总体规律是随 抗生素浓度的递增,菊花苗生根数量递增,根长、苗高递减;两种抑茵抗生素均能很好的抑制农杆茵的生长并对 “玉人面 有一定的侵染性。 关键词:菊花;抗生素;受体系统 中图分类号: . 文献标识码: 文章编号: ? ? ? ? . . . 。 : .. , 、 ../ /. / . ?.. ? ; .: ;; ’菊花是我国传统各花和世界重要切花。通过 究不同菊花品种遗传转化受体系统。本文就影响 基因工程导入新的基因来改良现有菊花品种,调 菊花品种“玉人面”遗传转化受体系统建立的因 控花色 、提高抗性 、改变植株株型口 和调控 素进行了研究,着重讨论了筛选抗生素卡那霉素 花期 等受到花卉工作者的关注,而高频的遗传、 和抑菌抗生素羧苄青霉素 、 转化效率依赖于高频再生的植物受体系统 。由 头孢霉素对菊花叶片不定芽分化和无菌苗 于不同品种的不定芽再生能力以及对抗生素、菌 生根、生长的影响,同时就抑菌抗生素对 、的抑菌效果,“玉人面”对不同农杆菌菌株的 株的敏感性不同,导致受体系统也各不相 同。。受体系统对基因型有依赖性,已有的 敏感性进行了比较,为后期遗传转化奠定基础。 某些菊花品种的遗传转化受体系统往往不适合所 材料与方法 有菊花品种,同时建立一个高频的基因转化受体 系统区别于一般的组织培养 ,以上因素增加了 . 材料与外植体的取得 不同菊花品种受体系统建立难度。因此有必要研 以具优良观赏性状、不定芽再生能力高且稳 收疆日期:修回日期: 一 一 作者简介:吕晋慧一 。女 汉 。山西祁县人,博士,主要从事园林植物遗传育种的研究。 基金项目:国家转基因植物研究与产业化开发专项 一维普资讯 http://山西农业大学学报 自然科学版 ,于 ℃、 振摇培养 ,然后取 定的菊花品种“玉人面”为供试材料。取 ~ 不同处理下的菌液于紫 的菊花无菌苗中上部充分展开的、生长健壮、均 外分光光度计上测定 。。值,同时以未经接种 匀一致的幼嫩叶片和生长均匀一致的长 . 的 的培养基为对照,两次重复。 茎段为外植体。 . 不同菌株侵染菊花叶片外植体后的瞬时表达 . 试剂、根癌农杆菌菌株及载体 卡那霉素、 、羧卞青霉素 检测 以含植物表达载体一 的根癌农杆菌、头孢霉素 、 分别由日本、 、侵染后的叶片为材料,未侵 、德国、上海、 公司生产,其 染叶片做对照,脱菌培养 后进行检测。 它为国产分析纯。 组织化学染色检测参照 的方法。。。 植物表达载体一、根癌农杆菌菌株 、 由北京林业大学安心民博士 结果与分析 后提供。 . 不同抗生素对菊花叶片不定芽再生和无菌苗 . 培养基及培养条件 . 生长的影响 生根培养基: / 分化培养基: 一 .. 不同选择性抗生素对菊花叶片不定芽再生/ ./ ,不同培养基均附 的影响 加蔗糖 . 、琼脂 . ,以上培养基均建立在 菊花品种 “玉人面”对和都十分 前期研究的基础上。 敏感,低浓度的和 即可完全抑制或部 培养条件:温度± ℃,光照强度~ ,光照时间为 / 。 分抑制不定芽再生 图 ,表 。其中/. 不同抗生素对菊花叶片不定芽再生及菊花试 的即完全抑制不定芽和愈伤的形成,而 ./ 条件下有的再生率,/ 管苗生根的影响 条件下部分叶片可以膨大, / 的 比较不同选择性抗生素对菊花叶片不定芽再 对叶片外植体产生毒害作用,在接种后约 生的影响。其中设 、 、 、 、 、 、、 、 /个梯度处理, 设 、 ~ 伤口边缘开始失绿白化或黄化。因此选 . 、 、 、 、 /个不同梯度处理, / 的作为 “玉人面”遗传转化中的 临界耐受浓度。 每处理接种 块外植体,两次重复。 比较不同选择性抗生素对菊花试管苗生根的 .. 不同选择性抗生素对菊花试管苗生根的影 响 影响。 、分别设 、 、 、 、 、、 、 、 / 个梯度处理,每处理接 、对菊花无菌苗生根有抑制作用。 种 个茎段,两次重复。 对照处理在 时,生根率达 ,平均生根 数 . 条,根长 .,根系