pH值对克雷伯氏肺炎杆菌发酵甘油产1，3-丙二醇的影响与控制.pdfVIP

亿 学与生 物 Z程 2011，Vo1．28No．8 Chemistry Bioengineering doi：10．3969／j．issn．1672—5425．2011．08．022 pH值对克雷伯 氏肺炎杆菌发酵甘油产 1，3一丙二醇 的影响与控制 徐卫涛 ，钟志辉 ，付水林，宫 衡 (华东理工大学 生物反应器工程 国家重点实验室，上海 2OO237) 摘 要 ：在克雷伯 氏肺炎杆菌发酵甘油产 1，3一丙二醇 (1，3-PD)的过程 中，不 同的 pH值控制对茵体生长、产物和副 产物的生成有着重要 的影响。通过对发酵过程 中不同pH值控制下的代谢分析 ，发现 pH值较低时菌体生长较慢 ，有利 于副产物 2，3一丁二醇的生成 ；pH值较高时茵体生长较快，有利于副产物乳酸 的生成 。通过两阶段 pH值控制策略，即在 发酵的前 14h控制 pH值为 7．0、后 16h控制 pH值为6．3，有效地抑制 了乳酸的生成 ，1，3-PD的最终浓度达到 67．32g · L-。，甘油的摩尔转化率达到 61 。 关键词 ：1，3一丙二醇 ；甘油；克雷伯 氏肺炎杆菌；pH值控制 中图分类号：TQ920．6 文献标识码 ：A 文章编号：1672—5425(2011)08～0081—03 1，3-丙二醇 (1，3-Propanediol，1，3一PD)是最有发 母膏 7．0，微量元素 0．3mL，pH值 7．0。 展前途的大宗化工原料之一 ，广泛应用于化妆品、食 品 发酵培养基 (g ·L )：KC10．75，NaH PO · 和医药等工业领域[1]。其主要生产方法有环氧乙烷合 2H2O 1．38，(NH4)2SO45．35，Na2SO40．28，M gSO4 成法、丙烯醛合成法和微生物发酵法，其中微生物发酵 · 7H2O0．26，柠檬酸 0．42，酵母膏2．0，微量元素0．3 法研究最多的生产菌株之一为克雷伯 氏肺炎杆菌 mL，pH值 7．0。 (Klebsiellapneumoniae)，其 以甘油为底物经一步发 微量元素配 比 (g ·L )：ZnC134．2，FeC1。 · 酵生产 1，3-PD，在发酵过程中产生大量 的副产物 ，主 6H2O 2．7，M nC12 ·4H2O 10．0，CuC12 ·2H2O o．85， 要包括乳酸、2，3一丁二醇 (2，3-BD)等 ]。为 了有效地 CoC12 ·2H2O 23．8，H3BO30．31，Na2M oO4 ·2H2O 提高 1，3-PD的产率，就必须降低各种副产物尤其是 0．25。 乳酸的生成_3]。1，3-PD是一种生长关联型物质_l4]， 1．2 培养方法 发酵 pH值会影响菌体的生长，进而对 1，3-PD的合成 培养条件 ：装液 量 50mL／250mL，培养 温度 产生重要影响。 37℃，转速 200r·rain～ ，培养时间 12h。 作者在此研究了克雷伯氏肺炎杆菌发酵甘油过程 发酵采用 5L全 自动发酵罐 (上海国强生化装备 中不同的 pH值控制对 1，3-PD和副产物生成的影响。 有限公司)，初始发酵培养基体积 2L，接种量 5 ，初 通过两阶段的pH值控制策略，调控代谢途径走 向，以 始甘油浓度 40g·L一，发酵液 pH 值 7．0，发酵温度 降低乳酸的生成、提高 1，3-PD浓度和甘油转化率 ]。 37℃，采用 2mol·L 的KOH溶液控制发酵过程 中 pH值，过程流加甘油，发酵时间3Oh。 1 实验 1．3 分析方法 1．1 菌株与培养基 生物量通过测