拟南芥种子发芽新方法研究.pdfVIP

安徽农业科学。JournalofAnhuiAsh．Sci．2009，37(6)：2503，2640 责任编辑 张彩丽 责任校对 傅真治 拟南芥种子发芽新方法研究 舒海燕，曹刚强，凌华，袁保梅，田宝明 (郑州大学生物工程系，河南郑州450001) 摘要 [目的]研究简便易行的拟南芥种子发芽方法。[方法]以哥伦比亚生态型拟南芥种子为材料进行诱变处理后统计种子发芽率。 [结果]结果表明，种子诱变处理发芽后，在白色的滤纸上，无论是发芽的幼苗还是没有发芽的种子，都可以非常清楚地看到。[结论]该 方法克服了常规发芽方法的缺点，能够很方便地计算出种子的发芽率。 关键词 拟南芥；诱变；发芽率；半致死剂量 中图分类号 $330．2 1 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2009)06—02503—01 ANew CdfivafionM ethodforArabidopsis SHUHai·yanetal (BiologyDepartment，ZhengzhouUniversity，Zhengzhou，Henan450001) Abstract lObjectivelTheresearchaimedtostudytheeasyandoperationalmethodsofArabidopsisseeds．M『ethod]Arabidopsisseedswere takenforthematerials，andaftermutationtreatment，thegerminatingcapacitywascalenlated．[Result]Theresultsshowedthatonwhitefiherpa． per，notonlytheseedlingscouldbeseenclearly，butalSOtheseedswhichhadn’tgerminated．[Conclusion]Theshortcomingsofcommonmeth odswereovercomed．Th egerminatingcapacitycouldbeeasilycalculatedbythismethod． Keywords Arabidopsis；Mutation；Germinatingcapacity；Medianlethaldose 在植物诱变研究中，一般Ml不加筛选。但是如果为了 法克服了常规发芽方法的缺点，很容易计算出诱变频率。 计算诱变频率或者寻找半致死剂量，则M1的种子需要全部 1 材料与方法 播种。为了保证计算结果的准确，种子的栽培方法要能够确 试验材料为哥伦比亚生态型拟南芥种子。将种子放于 保具有生命力的种子都能够发芽或生长。 r 4℃冰箱内春化3～4d。在 ．180衄 直径的培养皿中平铺约 拟南芥是研究植物生长发育的一种模式植物。因为其 2cm厚的蛭石，用 自来水浸湿。上面覆盖 1张 160nlln直径 基因组小、生长繁殖速度快而经常用来作为试验材料研究植 的滤纸。用 1ml的播种枪在滤纸上播种。播种完毕后盖上 物学上的一些基本问题 。但是，拟南芥种子的发芽生长 培养皿的盖子。放在4℃条件下处理4d。然后转移到22 对温度 、湿度和光照都有相应 的要求 。目前 ，拟南芥发芽 ℃条件下，光照条件为：光照 16h，暗处理8h。生长7～10d 方法主要有 2种 ：一种是直接把种子培养在土壤中；另一 即可对种子的发芽率进行统计。在 白色的滤纸上，无论是发 种是将种子种在无菌培养基上。第一种方法的缺点在于有 芽的幼苗还是没有发芽的种子，都可以非常清楚地看到。 些种子被土壤覆盖，见不到阳光，这些种子不能够发芽。第 2 结果与分析 二种方法的缺点在于将种子播种于无菌培养基前需要对种 按照试验中采用的方法种植拟南芥后大约 7d，部分种 子进行消毒处理，消毒过度容易造成种子死亡；消毒处理不 子开始萌发出芽。在 白色滤纸的背景下，看得非常清楚(图 够的情况下又容易造成培养基污染。这些情况中的任意一 1)。没有发芽的种子在滤纸上仍然为