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利用多波长微孔板细胞分析仪进行高 通量高涵量筛选 摘要： 荧光微孔板细胞分析仪（Fluorescence microplate cytometers ）专为大规模筛选工作而设计，拥 有在24 小时内进行30 万个高涵量数据点分析的能力（当采用1536 孔板时）。该仪器既可提供显微 镜 CCD 成像仪的目标识别能力同时结合高速度的数据采集速率，又可将发光荧光酶标仪（bulk fluorescence readers ）功能与较小的数据文件结合。由于具备全孔扫描的能力，这种仪器筛选数据的 统计质量得以大幅提升，对于那些检测视野要求比普通显微镜物镜可提供视野更大的检测分析，也可 以借助这种仪器而转为更高通量的自动化检测模式。 Acumen eX3 （TTP LabTech Ltd, Melbourn, • 每天可进行超过 30 万孔的高通量分析，无 UK.）是近期推出的一种多波长显微平板细胞分 需担心数据储存问题 析仪，同一台仪器可提供 405 、488 和 633 纳米 • 多种波长的激发光增加了适用于多重分析 3 种激发波长的激光扫描。这种优势大大扩展了 的荧光试剂的范围，提升了多重分析能力 可组合用于多色多重分析中的荧光试剂的范围 ——激发波长范围相当于白光光源的仪器。因此， • 应用范围包括细胞周期分析，多重免疫分 可将基于 CCD 成像系统设置的高涵量分析实验 析，以及 β- 内酰胺酶(β-lactamase)报告基因分析 步骤“无缝”转移到 Acumen eX3 上进行筛选。 1.微孔板细胞分析仪中的光学结构 显微平板细胞分析仪利用扫描激光激发微 孔板底的荧光物质，无需中间成像传递过程即可 从受激发而产生的荧光发射中得到高涵量信息。 在 Acumen eX3 仪器中，4 个光电倍增管（PMT） 检测器可同时监测每道激光可能对应产生的 4 种 发射荧光，最高可提供 12 通道数据，实现真正的 多重分析。Acumen eX3 这种多波长微孔板细胞 2. 分析仪通过扩大应用范围，以及增加分析的灵活 激光扫描细胞仪（Laser Scanning Cytometry） 性，为药物研发提供了一种新工具。 小结： • 微孔板细胞分析仪是一种高通量/高涵量筛 选的理想工具 2008年10月23日第44期 第 16 页，共 26 页 下一页 返回 扫描分辨率分别由 X 方向和 Y 方向进行定 义，3 维荧光密度图的建立使得对每个识别目标 进行荧光和形态学参数的计算成为可能。 3.运行通量和数据储存 以上数据源于Acumen eX3.单激光扫描，扫 将培养了 24 小时的 HeLa 细胞（每孔 2000 个）用紫杉醇(nocodazole)处理 22 小时， 描精度为 1µm x 8µm，时间单位为分钟。 再用 Vybrant® DyeCycle™ Orange 进行标记 4.常用激发荧光试剂表 （5uM，室温 30min ）对细胞培养物进行原位标 记。利用 Acumen eX3 微孔板细胞分析仪，以 488 Acumen eX3 可进行多个波长激光激发，每