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生防菌K346防治香蕉枯萎病的研究
余超1,肖荣凤1,刘波1*,吴水金2,蓝江林1
(1.福建省农业科学院农业生物资源研究所,福建福州350003;2.福建省农业科学院甘蔗所,福建漳州363005)
摘要:对生防菌346进行抗利福平和卡那霉素的抗性标记,得到双抗菌株K346,对利福平和卡那霉素抗性均为300μg/ml。研究双抗菌株K346在香蕉植株体内的定殖和对香蕉生长特性的影响,并进行对香蕉枯萎病的防治效果研究。结果表明:双抗菌株K346在香蕉植株根部的定殖量在接种后第10天达到最大,为2.15×105cfu/g;并能有效降低香蕉枯萎病对香蕉株高和叶片数量的影响,显著提高香蕉的根冠比。双抗菌株K346对香蕉枯萎病的盆栽苗防效和田间防效分别为83.67 %和53.59 %。
关键词:香蕉枯萎病;抗性标记;根冠比;生物防治
Abstract: Study resistance in the tag of the biocontrol strain 346 anti rifampin and kanamycin, get double antibacterial strains of K346, rifampin and kanamycin resistance are 300 μ g/ml. researched the colonization of double-antibacterial strains of K346 in banana plants, effection on the banana growth characteristics, and ?control effect on the banana Fusarium wilt. As a result, Double-antibacterial strains of K346 in the colonization of banana plant roots in the first 10 days after inoculation of reached its maximum size,is 2.15×105cfu/g,And can reduce banana blight on the banana plant height and the quantity of leaves, significantly improve banana root-shoot ratio. Ocntrol effect of double-antibacterial strains of K346 on the Fusarium wilt potted and field were 83.67% and 53.59% respectively.
Key words: Banana Fusarium wilt; antibiotic-resistance tag ; root-shoot ratio; biocontrol
前言
香蕉枯萎病(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)是由古巴尖镰孢侵染而引起维管束坏死的一种毁灭性香蕉真菌病害和典型的土传病害[1],其主要特征是病株凋萎和维管束腐烂。古巴尖镰孢有4个生理小种,我国香蕉枯萎病菌主要为1号和4号生理小种[2-3]。目前还没有有效防治香蕉枯萎病的化学药剂,采用生物防治是当前比较有效的途径之一[1]。国外Thangavelu等[4]研究了哈兹木霉对香蕉枯萎病的防效,国内游春平[5]、王振中[6]等均筛选到对香蕉枯萎病有抑制作用的拮抗菌。本研究通过对筛选到的一株对香蕉枯萎病有较好抑制作用的生防菌346进行抗性标记,研究该生防菌在香蕉植株体内的定殖和对香蕉生长特性的影响以及对香蕉枯萎病的防治效果,为香蕉枯萎病生防制剂的开发应用提供理论与实际依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试菌株:生防菌346为铜绿假单胞菌,分离自香蕉植株体内。香蕉枯萎病病原菌370为尖孢镰刀菌,由福建省农科院农业生物资源研究所微生物中心提供,经鉴定为生理4号小种。
1.2 生防菌K346的筛选和稳定性测定
采用吴蔼民等[7]的方法,筛选抗利福平300μg/ml和卡那霉素300μg/ml的生防菌K346。将K346在不含抗生素的LB培养液中连续培养20代,取适量涂布在含300μg/ml利福平和卡那霉素的LB固体培养基上,以不含抗生素的LB固体培养基为对照。30℃培养36小时后观察细菌菌落状态。采用抑菌圈法比较生防菌346和K346对病原菌370的抑制效果。
1.3 生防菌K346在香蕉植株体内的定殖
采用伤根接种法,以浓度为107cfu/ml的生防菌K346菌液对5-6叶期的香蕉盆栽苗进行接
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