晚期糖基化终末产物与糖尿病皮肤微血管病变的相关性研究.pdfVIP

维普资讯 832 · ShanghaiMedJ，2004，Vol27，No11 · 论 著 · 晚期糖基化终末产物与糖尿病皮肤微血管病变 的相关性研究 林炜栋 陈向芳 陆树 良 青春 葛奎 戎柳 牛轶雯 王敏骏 摘【要】 目的 研究晚期糖基化终末产物(AGE)与糖尿病(DM)皮肤微血管病变的关系，探讨DM创面新 生血管化障碍或延迟的机制。方法 应用链脲佐菌素 (STZ)将 sD大 鼠诱导成速发型DM 大鼠模型，并以正常 sD大鼠作为对照，于致病后 12周获取大鼠背部 中央的皮肤标本。应用 F一3010荧光分光光度计和免疫组织化 学技术测定皮肤中AGE含量的变化；应用透射电镜观察皮肤微血管超微结构 的改变。再选用人脐静脉内皮细 胞株ECV304细胞与不同浓度的AGE修饰人血清 白蛋白(AGE—HSA)在体外共 同培养 ，采用四甲基偶氮唑蓝 (M1vr)比色法和流式细胞仪检测 AGE对人血管内皮细胞活性的的影响。结果 DM大 鼠皮肤胶原提取液的荧 光值明显高于相应年龄的正常大鼠(P0．01)；免疫组织化学检测显示 DM 大鼠皮肤 中AGE呈片状或块状沉 积 ，其表达阳性率和强阳性率显著高于正常大鼠(P0．01)；DM大鼠皮肤普遍存在微血管病变，主要表现为血 管内皮细胞变性和基底膜增厚 ；内皮细胞经 100~g／mlAGE—HSA干预6h后 ，采用 MTT法测定其吸光度值显 著低于正常大鼠(P0．01)，流式细胞仪测定的各时相点凋亡细胞百分率亦明显高于正常大鼠(P0．01)，且均 呈时间和剂量的依赖性。结论 AGE是DM皮肤微血管病变的重要致病因素，亦是DM合并创伤后新生血管 化障碍或延迟的病理基础。 【关键词】 晚期糖基化终末产物；糖尿病；微血管病 Correlativestudyofadvancedglycationendproducts(AGE)anddiabeticskinwithmieroangiopathy L仆，w 一 dong，CHENXiangfang，LUShuliang，eta1． ShanghaiBurnInstitute，RuijinHospital，SharIghaiSecond MedicalUniversity，Shanghai 200025，China A【bstract】 Objective Toexploretherelationshipofadvancedglycationendproducts(AGE)anddiabeticskin withmicroangiopathyandthemechanism ofimpairedwoundhealing．Methods 18maleSprague—Dawley(SD)rats weighing200—220gwererandomizedintothecontrolandSTZ—induceddiabeticgroups．Theshavedskinspecimens from thebackofratswerecollectedat12W afterSTZ—inducing．SkinAGE concentrationswereassessedbydetecting thetotalfluorescenceintissuecollagenwith F一3010spectrofluorometerand immunohistochemistryassay．Theultra— structuralchangesofskinmicrovesselswereobservedbyelectronmicroscopy．Humanumbilicalvein endothelialcells