核酸纯化的CharqeSwitch技术.pdfVIP

维普资讯 ● 一 国Invitrogen WWW invitrogencom．Cn 译 ／廖雅静 上 ．过去20年间，分子生物学 用了一A名为pKa的化学概念，在纯化 去对表面的亲和力，从而立刻被释放进 究已经经历了爆炸性的成 过程中，全部利用100％水相的缓冲按 入洗脱缓冲液中，并可以直接用于太部 I—L一长。如今，技术性的进步日 来 打开”或 关闭”一个pH依拯性 分的下赫的实验中．ChargeSwitch。的处 新月异 核酸纯化已经成为几乎所有 的离于开关。这项技杉能在多种表面 理过程不需宴使用任何乙醇沉淀， 的分子生物学方面的 究的准备阶段 上使』=}j，包括磁化珠子，乳狡颗粒，玻 燥 或者重悬的步骤，能够更有效的节 的必备工作 但是埙_二 世纪80年代 璃以及买验室等级的塑料。利用 省处理样品的时间： 到现在，人们在核酸纯化技术_二并汞 ChargeSwitch。技术处理过的表面，在 当要求U微量的样品中分离DNA 取得很大的进展。瞩离子交接以及琏 pH值低的情况下 (pH6．5)市有王电 ， 例如镭射显徽切割的组织或者法 技纯化的方法仍然是目前最常用舱技 萄，在高的pH值条件下 (pH859·0) 置学样本，即使是痕量的抑制性杂贡 术，但是这两种技术都既耗时又唯以 别呈现中性 进厅自动，艺操作 更令人忧虑的是， ChargeSwitch*技术 在这两项拄禾中都会使用到乙醇和高 几乎适音于 任何一种 ● 离液盐 (chaotropicsalt)，而这些成分 腰料中舟离高纯度的 ● 都可能会污染已提纯自々核酸，井星对 DNA和RNA，包括酵母、 ■ 于已纯化棱酸的下游应晨中所参与的 绁菌、组织．血棱 植物、 许多敏感的酶促反盥会 生抑制咋 口腔细咆、PCR反应产 用 物 以及法医学栏品。 目前，Invitrogen公司将为炷提撇 ChargeSwitch~的分离步 pH值假于喵s日 Char~# 一 种全新的核酸纯化技术供您选择。 骤色括简单的，三步处 一eSwteht|~为正电性． ChargeSwitch~~技术，一项崭新的．能 理过程：嘎附，清洗，以 在理檀豹卉厦枭件下选择 充舟满足您对干摊化棱酸的要求的选 及冼脱 见【图1)。在冉继 牲的绮音DNA分子 择。ChargeSwitch技术在满足您对于 胞或组纽裂解着，在低 咎 杂质 接酸纯度的基本要求的基础之上．还 PH 筐条 件 F墅过 。 。 。 I 具有一系列独特的饨扇 ChargcSwitch。处理的表 ． 非磕殴的杂质植洗睨