Na^＋,K^＋-ATP酶在大鼠皮质神经元缺氧性损伤中的作用.pdfVIP

维普资讯 第二军医大学学报 2008年 2月第 29卷第 2期 http：／／www．cljsD2D2U．f” AcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity，Feb．2008，Vo1．29，No．2 DOI：10．3724／SP．J．1008．2008．00171 · 论 著 · Na+ ， K+-ATP酶在大 鼠皮质神经元缺氧性损伤 中的作用 董 惠 ，李 彬 ，郭 芳 ，郭会彩 ，王永利 “，李春岩h 1．河北医科大学第二医院神经内科 ，石家庄 050000 2．河北医科大学药理学教研室，石家庄 050000 [摘要] 目的 ：探讨缺氧对Na ，K 一ArP酶活性的影响，以及高亲和力Na ，K 一ArP酶和低亲和力Na ，K 一ArP酶在缺 氧损伤中的不 同作用。方法 ：通过切换低氧灌流液模拟大鼠脑片和原代培养 的皮质神经元缺氧环境 ，以脑片膜片钳全细胞模式 记录Na ，K 一ATP酶电流和膜 电流，以可视化动缘探测系统测定培养的皮质神经元内钙离子浓度([Ca2])，观察缺氧4min时 脑片皮质神经元 Na ，K 一ATP酶 电流的变化，以及缺氧 2、4、6、8和 10min时在有、无哇巴因(Na ，K 一ATP酶阻断剂)存在情 况下皮质神经元膜 电流密度和[Ca ]。的变化。结果 ：缺氧4min总Na ，K 一ArP酶电流密度(O．160_+0．046pA／pF)较缺氧前 (O．265±0．068pA／pF)显著降低(PO．01)，但 10min缺氧可时间依赖性显著升高皮质神经元 的膜 电流密度(r一0．9803，P 0．01)和[Ca ](r=0．9734，P0．01)；10ttmol／L哇巴因可通过抑制低亲和力Na ，K 一ArP酶进一步增强此种缺氧所致的膜 电流密度和[Ca ]．增大作用(PO．05或 0．01)，但 10nmol／L哇巴因则通过抑制高亲和力 Na ，K 一ATP酶显著降低缺氧对二 者的增大作用(PO．05或0．01)。结论 ：Na ，K 一ATP酶活性改变参与了皮质神经元 的缺氧性损伤 ，其 中高亲和力 Na ，K 一 ATP酶与皮质神经元缺氧性损伤保护作用有关，而低亲和力Na ，K 一ATP酶则与其缺氧性损伤有关。 [关键词] Na ，K 一ATP酶 ；缺氧；神经元；钙信号；膜片钳术 [中图分类号] R743．31 [文献标志码] A [文章编号] 0258—879X(2008)02—0171—06 Roleofsodium pumpNa+-K+_ATPaseinhypoxicinjuryofcorticalneuronsinrats DONG Hui，LIBin ，GUO Fang ，GUO Hui—cai，WANG Yong—li ，LIChun-yan 1．DepartmentofNeurology，theSecondAffiliatedHospitalofHebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050000，China 2．DepartmentofPharmacology，HebeiMedicalUniversity，Shijiazhuang050000 ~ABSTRACT] 0bjective：ToinvestigatetheeffectofhypoxiaontheactivityofNa一K 一ATPase(Napump)andtounderstand thedistinctfunctionsofhigh—andlow—affinity Napumpduring hypoxiaofcorticalneurons．Methods：Hypoxicconditionwas m imickedbyperfusingcorticalslicesorculturing corticalneuronswith low oxygensolution．Sodium pumpcurrentandmem— branecurrentofneuronsfrom corticalslicesweremeasuredbypatch—clamptechniqueinthewholecellm