醋氨酚所致精密肝切片损伤模型的建立及CYP2E1的调节作用.pdfVIP

维普资讯 · 46 · ChinJCainPharmacolrI11er20o8Jan：13(1 中国临床药理学与治疗学 ◇基础研究 ◇ 中国药理学会主办 cN34-t206／R．ISSN t009-250t E-maihecpOS@21en．corn 2008Jan；t3(1)：46—50 醋氨酚所致精密肝切片损伤模型的建立及 CYP2E1的调节作用 李婧婷，汪 晖，潘晓靓，鄢友娥，郭 喻，张本坚 武汉大学基础医学院药理学系，武汉430071 摘要 目的：利用精密肝切片(PCLS)技术，建立 术 ；肝损伤 醋氨酚 所致肝 切 片损伤 的体外模 型，并探 讨 CYP2E1活性变化对肝损伤的调节作用，为研究和 中图分类号：R966 筛选肝保护药物提供实验依据 。方法 ：利用振荡 文献标识码 ：A 切片机制备 PCLS，建立培养系统。将终浓度为 文 章 编 号：1009．2501(2008)01．OO46．05 500tanol／L的醋氨酚分别与切片共孵育 0、2、4、 6h，测定培养基和切 片中的谷胱甘肽 S．转移酶 细胞色素450(cytochromeP450，CYP450)混合 (GST)和乳酸脱氢酶(LDH)活性 。在体给予不同 功能单加氧酶是一组结构和功能相关的超家族基 剂量(0．25、0．5、1．0g，kg)的CYP2E1诱导剂 乙醇， 因编码的同工酶系，主要存在于生物体的内质网 每天一次，连续3d。末次给药 8h后处死动物， 上。大多数外源物(包括药物和毒物)在体内的氧 取其肝脏制备PCLS，再与 500tLmol／L醋氨酚共同 化代谢都是通过肝微粒体 CYP450完成的，但此 孵肓 6h，检测ALT和LDH漏出率。正常PCLS与 过程也可生成有毒的活性物质(如 自由基、亲电子 不同浓度 的二 乙基二硫代氨基 甲酸酯盐 (DDTC， 基等)而导致肝损伤。此外，CYP450同工酶活性 CYP2E1抑制剂)(5、10、20tanol／L)、500tnnol／L醋 还可被某些外源物所诱导或抑制，从而影响外源 氨酚共 同孵育 6h，检测ALT和 LDH漏 出率。结 物在体内的代谢速度。因此，CYP450在药物及毒 果：与常规培养组比较，醋氨酚孵育4、6h组的 物所致的肝损伤发病中起着重要作用。 GST和 LDH漏出率显著升高(P0．01)。与醋氨 CⅥ】2E1是 CYP450家族 中的重要成员。研 酚模型对照组 比较，乙醇中、大剂量组 LDH漏 出 究发现，CYP2E1不仅参与许多药物在体 内的代 率和小、大剂量组 漏 出率 皆升高(P0．01， 谢，而且还能催化许多前致癌物和毒物的活化过 P0．05)；DDTC各浓度组 漏 出率则降低 (P 程，如三氯 乙烯、氯仿 、苯等的体 内代谢都与 0．05)。结论 ：PCLS与 500tanol／L醋氨酚共孵 CYP2E1有关，同时这些化合物也是 CYP2E1的选 育4h即能成功地建立体外肝切片损伤的模型。 择陛诱导剂 ¨j。本室前期研究发现，在肝星状 抑制 CYP2E1活性可能对醋氨酚所致的肝损伤有