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· 134 · 四川医学2008年 2月第29卷 (第 2期) SichuanMedicalJounml，2008，Vo1．29．No．2
●基础与实验研究 ● 论著
电穿孔法介导质粒 DNA转化大肠杆菌 XL1．BlueMRF菌株的实验研究
· 王宋平，钱桂生△，李玉英，谭红梅 ，黄桂君，安晓静
(第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所，重庆 400037)
摘【要】 目的 探讨电穿孔法介导质粒DNA转化大肠杆菌XL1一BlueMRF的最佳条件，提高其转化效率。方法 将
pCMV-Serip质粒转化大肠杆菌XL1一BlueMRF菌株 ，观察不同的电转化条件对转化效率的影响。结果 电场强度、脉冲时
间、电击缓冲液的离子强度、细菌生长状态、感受态细胞保存时间、质粒 DNA浓度对转化效率均有不同程度的影响；在电
压2．0kV，电阻20oQ，电容 25 ，脉冲时间4．3ms和低离子强度电击缓冲液的条件下转化，能获得较高的转化率。结论
优化电穿孔条件能提高转化效率。
【关键词】 电穿孔法；质粒DNA；转化；大肠杆菌XL1一BlueMRF
【中圈分类号l R378．21 文【献标识码】A 文【章编号】 1004-0501(2008)02-0134—04
Experimentalresea岫 Onl~nsfommfionofplasmidDNAintoE~．herichiacoilXL1．BlueMRFpstrainmediatedbyelectro．
porat~n．WANGSong-ping， Gui—sheng，ⅡYu—ying，eta1．InstituteofRespirator)MedicineofP ， 叼 Hospital，ThirdMill—
taryMed／ca／Un／vers~ ，chongq~ng 400037，China
【Abstract】 Objective ToexploretheoptimalprotocoloftransformationofplasmidDNAintoEseheriehiacoli(E．co~)XL1一Blue
MRF mediatedbyelectroparationandimproveitstransformationefficiency．Methods PlasmidpCMV—ScripWas transferredintoE．coli
XL1一BlueMRF strainbyelectropomfionusingdifferentelcetrortansformationcondiuonsnadtransformationefffciencyWas observde ．Re．
suits Thetransformationefficiencywasaffcetedbyelectricalfields~,cth，pulsetime，ionicstrengthofelcetroshockbuffer，growthphase
0fgerm，storagedurationofcompetentcellsnadconcentrationofplasmidDNA．Theoptimaltransformationparametersforhlgh~ rtangor·
marionefficiencywerevoltage2．OkV，elcetricresi~naee20012，capacitance25 ，pulsetime4．3msnadelcetrortansformationbufferwith
low ionicst~,cth．Conclusion Optimizedelcetrotransformationconditionscna improvetransformationefficiency．
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