电针镇痛及CaCl2对小鼠脑突触体[Ca^2＋]i的影响.pdfVIP

维普资讯 实 验 研 究 电针镇痛及CaCI2对小鼠脑突触体[Ca】的影响 章明美 谢吉民 (江苏大学化学化工学院，江苏镇江212013) 摘 要 目的 ：探讨电针镇痛及 CaC1，对小鼠下丘脑 (HT)、导水管周围灰质 区(PAG)、海 马突触体 游 离Ca2+浓度的影 响 方法：用荧光染料Fura一2／AM 测定在 电针 镇痛期 间，小鼠下丘脑、灰质 区、海马突触体内游离钙浓度 (fCa十1，)的改变。结 果 ：电针镇痛时，下丘脑、灰质 区、海马突触体 C『a2+1明显降低 ，向分离出的海马突触体培养液 内加入 CaC12，电针后突触体 C『a1+1明显降低 结论 ：电针的镇痛效应可能与下丘脑、灰质区、海马等突触体 内钙离子浓度的变化密切相关 关键词 电针 脑细胞 突触体 游 离钙 ICR小 白鼠 雌性 中图分类号 R245．97 文献标识码 A 文章编号 1672—397X(2008)03-008302 突触 (synapses)是神经信息传递的关键部位 ．参与各种神 照组 、电针组 、CaC1组 、CaC12十电针组 ，每组 8只。 经细胞的生理 、病理活动 。突触体 (svnaptosome)保 留着原位突 1．2 试荆 Fura一2／AM、盐酸异博定 (verapamil)、硝苯吡啶 触的机能特性 ．像一般 的细胞一样 ．有完整 的膜 ．内含有各种 (nifedipine)和 A23187均购于美 国Sigma公司 ．HEPES(N一2一 细胞器和胞浆 ”【。突触膜上有离子通道 ，具有生理活性 ．对突触 羟 乙基 哌嗪一N’一2’一乙烷磺酸)为BDH进 口分装 ．其他试剂 体 内外 Ca：+的平衡起调节作用 ．类似于完整 的活细胞 即当神 为国产分析纯或生化试剂。所有溶液均以重蒸水配制。 经冲动经过轴突传至末梢突触小体时 ．引起突触前膜兴奋 ．爆 1．3 仪器 AFX—DX型倒置荧光显微镜 (日本 Nikon公司)： 发动作电位 ．此 时突触前膜对 Ca“的通透性增大 ．Ca“由突触 CO气流培养箱 (美 国Sheher公司)：KWD一808II型多功能 间隙经前膜进 入突触小体 的前膜 内侧 起一定的生理作用 2[31 电麻仪 (江苏武进第三无线 电厂)：XMTH数显温控仪(浙江余 因此 ．突触体是在离体条件下探讨神经系统生理或病理机制 姚市远东数控仪器厂)；CaryEclipse荧光分光光度计 (美国)； 常用的实验材料 本实验在前面工作的基础上141．采用荧光染 高速冷冻离心机 (美国)：圆筒形颈夹台(自制) 料 Fura一2／AM测定在 电针镇痛期 间．小 鼠下丘脑 、导水管周 围 1．4 HEPES缓冲液的组成 (ITIITIO1／L) NaC1(128．0)，KCI(5．0)， 灰质 区、海马突触体 内游离钙浓度 (C『a：+1)的改变及 CaC1对 MgSO4(1．2)，KH2PO4(1．2)，CaC12(1．2)，葡萄糖 (10．0)。HEPES 小 鼠下丘脑 、灰质区和海马突触体游离 ca：+浓度的影响．以探 (20．0)，pH7．40。 讨针剌镇痛与突触体 内游离钙浓度变化 的关系．从而进一步 1．5 处理方法和痛阈测定 将动物静置于 自制圆筒形颈夹 探讨钙离子在镇痛过程 中的作用机理