改良型TAT-VP3融合蛋白的基因合成、原核表达载体构建及表达的实验研究.pdfVIP

维普资讯 昆 明 医 学 院 学 报 2008，(1)：1～6 CN 53一lo49／R JournalofKunmingMedicalUniversity 曛 改良型TAT—VP3融合蛋白的基因合成、原核表达载体 构建及表达的实验研究 詹 辉，王剑松，王 超，徐鸿毅，左毅刚，杨德林 (昆明医学院第二附属医院泌尿外科，云南 昆明 650101) [摘要] 目的 研究改良型TAT—VP3融合蛋白的基因合成、原核表达载体的构建及其原核表达．方法 首 先通过基因拼接法合成VP3基因并委托生物技术公司合成改良型TAT基因．然后于原核表达载体pGEX一6p一1 上构建改良型TAT—VP3融合蛋白的基因．最后将构建好的原核表达载体转导人基因工程菌DH一5Of．中并诱导 其表达．结果 成功合成了VP3基因，构建了改良型TAT—VP3融合蛋白的原核表达载体，并经基因测序证明 构建无误；成功的在基因工程菌DH一5Of．中诱导了改良型TAT—VP3融合蛋 白的表达．结论 改良型TAT—VP3 融合蛋白的基因合成、原核表达载体的构建及其原核表达是可行的，为进一步的蛋白制备及活性研究打下了基 础 ． [关键词]改良型TAT—VP3融合蛋白；基因合成；原核表达载体构建 ；原核表达 [中图分类号]Q816 [文献标识码]A [文章编号]1003—4706 (2008)O1—0001—06 ExperimentalStudyontheGeneSynthesis，Prokaryotic ExpressionVectorConstruction andExpressionofImproved FusionProteinTAT 一Ⅶ 3 ZHANHui，WANGJian-song，WANGChao，XUHong-yi，ZUOYi—gang，YANGDe—lin (Dept．ofUrology，The2ndAffiliatedHospitalofKunmingMedwdUniversity，KunmingYunnan 650101，China) [Abstract]Objective ToexplorethegenesynthesisoffusionproteinTAT-VP3，constructionofthe prokaryoticexpressionvectorpGEX一6p—l—TAT ／VP3na dtheexpressionofthisfusionproteininE．coliDH一5Ot． Methods First，thegeneofVP3wassynthesizedthroughgenesplicing．Atthesalnetime，thesequenceof improvedTATWas designedandthenaspecialbiologicalengineercompnayWas askedtocomposeit．The sec0nd step Was to construct the prokaryotic expression vector pGEX一6p—l—TAT ，、，P3．Atlast， this DrokaryoticexpressionvectorWas transplna tedintoE．coliDH一5Ot， then theexpression ofthefusionprotein f、4P3Was induced．Results ThegeneofVP3Was synthesized andhteprokaryoticexpression vector pGEX一6p—l—TAT／VP3Was constructedsuccessfully，Whichwascorroboratedbythenaalysisofgenesequence． Thef_usi