伏隔核毁损对大鼠MAP觅药行为及边缘区多巴胺D2受体的影响.pdfVIP

维普资讯 122 ChinJNervMentDis Vo1．34，No．2 February2008 · 短 著 述 · 德公司。各组大鼠给予2％戊巴比妥钠 (40mg ·kg )腹腔麻醉 后开胸 ，经左心室灌注 ，先用 100mL生理盐水冲净血液 ，然后用 预冷的含4％多聚甲醛0．1mol／LPBS缓冲液500mL灌注后，取 伏隔核毁损对大鼠MAP觅药行为及 全脑 ，用含4％多聚甲醛0．1mol／LPBS缓冲液 (含0．1％DEPC) 边缘区多巴胺 D：受体的影响 固定 lh。常规脱水、浸蜡、包埋 。切片厚度8 ，玻片采用多聚 赖氨酸处理 。切片经常规脱蜡至水。3％双氧水室温 5～10min 王晓峰 “ 刘建新 李拴德 张荣军 以灭活内源性酶 。蒸馏水洗3次。滴加 3％柠檬酸新鲜稀释的 [关键词] 伏隔核 甲基苯丙胺 觅药行为 条件性位置偏爱 胃蛋 白酶 ，37℃或室温消化20min，原位杂交用 PBS洗 3次 ×5 min。l％多聚 甲醛 、0．1mol／LPBS(pH7．2～7．6，含有 0．1％ 随着苯丙胺类药物的长期滥用，其精神依赖性和严重的毒性 DEPC)室温后固定 10min。蒸馏水洗涤3次。每张切片加预杂 作用问题也 日益突出。研究证 明，中脑 一边缘区多巴胺系统 交液20 L。恒温箱38℃4h。吸取多余液体，不洗。每张切片 (mesolimbicdopaminesystem，MLDS)在药物精神依赖性中起重要 加20 L杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜 作用 ，其 中，伏隔核(nucleusaccumbens，NAc)在药物渴求的建 揭开后，盖在切片上 。恒温箱 38~C杂交过夜。揭掉盖玻片，37~C 立中起关键性作用 。本文利用条件性位置偏爱 (conditioned 的2×SSC洗涤5min2次；37℃的0．5×SSC洗涤 15min1次 ； placepreference，CPP)试验模型 ，选用 SD大 鼠，研究 甲基苯丙胺 37℃的0．2×SSC洗涤 15min1次。滴加封闭液：37℃ 30min。 (methamphetamine，MAP)依赖大鼠的位置偏爱行为，并通过毁损 甩去多余液体，不洗。加生物素化 鼠抗地高辛，37℃60min。原 NAc观察其对大 鼠CPP和边缘区多巴胺 D 受体 (dopaminere— 位杂交用PBS洗5min3次。滴加SABC，37℃ 20min。原位杂交 ceptor2，DRD)的影响，研究NAc毁损在 MAP依赖戒断中的治 用PBS洗5min3次。加生物素化过氧化物酶 ，37~C20min，原位 疗作用。 杂交用PBS洗5min4次。使用DAB显色试剂盒一lmL蒸馏水 1 材料和方法 加显色剂 A，B，c各 l滴 ，混匀 ，加至标本上。显色20min，充分 1．1 动物分组及CPP模型的建立：雄性 Sprague—Dawley大 鼠80 水洗。苏木素复染。酒精脱水，二甲苯透明，封片。光镜下观察 只，体质量 180～220g(由第 四军医大学实验动物研究中心提 待检边缘区区域，用 40O倍观察每张切片 l0个视野。Motic 供)，单纯随机分为4组 ：对照组、模型组、假手术组和手术组