白细胞介素-10选择性抑制钛颗粒激活的巨噬细胞活性研究.pdfVIP

维普资讯 · 1358 · ：2004年 11月 21卷 1 2004．V0l21。No．1 · 实 验 研 究 · 白细胞介素一10选择性抑制钛颗粒 激活的巨噬细胞活性研究 王毅 何川 杨庆铭 邓廉夫 SturadGoodman 摘【要】 目的 本实验研究钛颗粒通过特定的信号传递通道激活巨噬细胞的转录因子核因子 一 IL～6(NF—IL-6)、核因子．KB(NF—KB)的表达，检测 白细胞介素(IL)一16、．6和肿瘤坏死因子 (TNF)一a 水平，并采用细胞因子抑制剂 IL-10处理巨噬细胞，观察其对巨噬细胞活性的抑制作用。方法 从 健康人外周静脉血中分离单核 ／巨噬细胞，进行体外培养。巨噬细胞处理用钛颗粒浓度为0．075％ (体积 比)。IL-10组先用 IL-10(20a／g／L)预处理巨噬细胞 10min，后再加入钛颗粒。按不同时间段 采集细胞培养液和巨噬细胞。培养液中细胞因子 IL-6、IL-I3{和TNF．a采用ELISA方法检测。巨 噬细胞经核酸抽提。采用EMSA方法检测NF．IL-6和NF-~B，并经半定量分析。结果 未经钛颗粒 刺激的巨噬细胞，48h内上清液中未能检测出上述细胞因子。钛颗粒刺激后2h，上清液中检测出 IL6，4h后可检测出IL-113和TNF．a。TNF—a在 12h达到高峰，IL-6和 IL．1B在 24h达到高峰，随 后下降。IL-10在各时相抑制近一半 IL一6的释放(P0．05)；IL。16和 TNF．a也受到 IL-10不同程 度的抑制，但是差异并无显著性(P0．05)。经钛颗粒刺激后 1h，EMSA方法即可检测出NFIL-6 表达，并持续表达 5h。IL一10预处理的巨噬细胞，NF—IL-6的表达量减少(P0．05)。巨噬细胞受钛 颗粒刺激后，出现NF—B表达，并随时间表达减少 (P0．05)。然而，IL．10预处理并不减少 NF—B 表达 (P0．05)。结论 钛颗粒能够激活巨噬细胞合成和释放细胞因子 IL一6、IL一16和TNF一。IL_ 10抑制NF—IL-6的表达，从而抑制 IL．6的合成和释放，为解决假体周围骨溶解问题，提供一种新的 可能。IL一1选择性抑制NFIL-6，说明巨噬细胞对不同的刺激，存在有不同的信号传递途径。 关【键词】 IL一10； 钛颗粒； 巨噬细胞； 骨溶解 IL-10selectivelyinhibitingtheactivityofmacrophagestimulatedbytitanium particles W_ANG H ． HEChuan，YANGQing-ming，eta1．DepartmentofOrthopaedics，ShanghaiInstituteofTraumatolo— gYandOrthopaedics，RuOnHos／ntal，ShanghaiSecondMdeicalUniversity，Shangha i200025，China A【bstractl Objective Toinvestigatetheexpress~noftranscriptionfactors，NF—IL一6andNF一c·Binthe macrophagesactivatedbytitanium particlesthroughspecificsignaltransductionpathwaysand todeter— minethelevelofTNF-a，IL_1pandIL．6as；anindexofmacrophageactivation．Thecytokinesynthesisin— hibitoryeffectsofIL一10wereobservedaswel1．Methods Monocytes／macrophageswereisolatedfrom theperipheralbloodofhealthyadultsandculturedinvitro．Themacrophages wereexposde toa0