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第28卷,第12期 光谱学与光谱分析
200 and December,2008
8年12月 Spectra/Analysis
Spectroscopy
免疫纳米金催化氯金酸-盐酸羟胺光度法检测免疫球蛋白G
邓俊耀1’2,张声森1,蒋治良h3+
1.广西师范大学环境与资源学院,广西桂林541004
2.桂林市妇幼保健院,广西桂林541001
3.桂林工学院材料与化学工程系,广西桂林541004
摘要在pH2.27的柠檬酸钠一盐酸缓冲溶液中,纳米金对氯金酸一盐酸羟胺生成较大粒径金颗粒这一慢
000
反应具有较强的催化作用。较大粒径金颗粒在600~1nln处有一个较宽的吸收峰。将纳米金标记羊抗人
IgG获得免疫纳米金,免疫纳米金也具有相同催化效果。在一定条件下,金标记羊抗人IgG与IRG发生特异
000
性结合生成纳米金免疫复合物。以16 rpm速度离心分离获得未反应的纳米金标抗上层溶液。以它作为
催化剂催化氯金酸一盐酸羟胺微粒反应,700nm处的吸光度A瑚。线性降低。其降低值△A彻。与IgG在0.1
~10 rig·n1L~。本法具有灵敏、快速和较高的特异性,
llg·mLll范围内呈良好线性关系,检出限为0.06
用于定量分析人血清IgG,结果满意。
关键词免疫球蛋白G;免疫纳米金;纳米金催化;光度法
文献标识码:A
中图分类号:()657.3 DOI:10.3964/j.issm1000-0593(2008)12—2935—04
缓冲溶液;聚乙二醇6000(华美生物工程公司);100嵋·
引 言 mL-1胶体金(5,i0,15
胶体金标记技术因具有简单、快速、无污染等特点,在 西陇化工厂);pH为1.67~3.69柠檬酸钠一盐酸缓冲溶液,
1.5mol·L-1
免疫检测中应用广泛[1.3]。近年来,以标记后的免疫纳米金 NHs·Hzo。金纳米粒子制备采用柠檬酸三钠
作品种来放大检测信号取得了很好的结果[4。121。免疫球蛋白 法。羊抗人IgG的金标记:用0.10mol·L叫l(2C03溶液、
G是一种常见的抗原,它的分析方法已有报道[1¨引。但未见 0.10mol·L-1 mL胶体金溶
HCI和精密pH值试纸将100
mL
采用简便易推广的光度法傲检测技术[17J81,将免疫纳米金一液的pH值调到6.5。在磁力搅拌器缓慢搅拌下,将4.5
氯金酸-盐酸羟胺催化反应与金标记免疫反应结合测定痕量 羊抗人IgG(1:25)滴加到胶体金溶液中,控制时间为5
mL
min,然后加入1.67
IgG的工作发表。本文建立了一个测定超痕量IgG的高选择
min后放置4℃保存。纳米金
性的免疫纳米金催化分光光度新方法。 终浓度约为0.05%),搅拌15
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