HPLC法分离测定左炔诺孕酮中右旋异构体.docVIP

HPLC法分离测定左炔诺孕酮中右旋异构体 尹燕杰1, 李欣1, 张昊天1,马跃1 ,何志一1,张启明2 (1.哈尔滨市食品药品检验检测中心，哈尔滨150525；2.中国食品药品检定研究院，北京100050） 摘要 目的：建立手性固定相拆分炔诺孕酮的高效液相色谱法,检查左炔诺孕酮中右旋异构体杂质的含量。方法：采用CHIRALPAK IC(250mm×4.6mm，5μm)手性色谱柱，流动相为正己烷-无水乙醇（75∶25），流量为1.0mL·min-1,检测波长237nm, 柱温25℃，并考察了影响分离的因素。结果：所建方法使炔诺孕酮对映体达到基线分离，可检测左炔诺孕酮中右旋异构体杂质含量。结论：所建方法简便，重复性好，可用于左炔诺孕酮原料和制剂的质量控制。 关键词：左炔诺孕酮；右旋异构体；高效液相色谱法；手性拆分 ；杂质 中图文分类号：R921.2 文献标识码：A 文章编号： HPLC Separation and Determination of Optical Isomer of Levonorgestrel Yin Yanjie1, Li Xin 1 , Zhang Haotian1，Ma Yue1，Zhang Qiming2 （1. Harbin Testing Center for Food and Drug, Harbin 150525；2. National Institutes for ood and Drug Control，Beijing 100050） Abstract Objective：To establish a chiral stationary phase-HPLC method for the enantiomer separation of norgestrel and determination of optical isomer in levonorgestrel. Methods: The chiral separations were performed on CHIRALPAK IC(250mm×4.6mm，5μm)chiral column with the mobile phase consisted of hexane-alcohol(75:25) at a flow rate of 1.0mL·min-1,the column temperature was at 25℃，and the detective wavelength was 237nm. Result: The enantiomers of norgestrel were successfully separated and optical isomer impurities in levonorgestrel were determined. Conclusion: The study provides a simple and reproducible method for the quality control of levonorgestrel and its preparations, Key words: levonorgestrel；optical isomer； HPLC；chiral separation；impurity 2倍[1] 。左炔诺孕酮分子中有6个手性碳原子，其中8，9，10，13，14位手性碳原子处于甾体母核上，为刚性结构，不容易发生构型翻转，只有17位手性碳原子可能产生对映异构体，左炔诺孕酮的化学结构式见图1。目前，除《英国药典》（BP）2012年版中左炔诺孕酮片项下收载了HPLC手性流动相方法的光学异构体〔鉴别〕项[2]外，其他各国药典[3-5]收载的原料和制剂均以〔性状〕项下的比旋度说明药物的光学纯度。影响比旋度数值的因素多，该数值的变化并不能灵敏地反映出立体异构体含量的变化。而且，消旋炔诺孕酮和左炔诺孕酮目前同时在市场流通,因此，标准中设置立体专属性的质量检测指标和控制其非活性右旋异构体具有重要的意义。有文献报道采用C8柱，以羟丙基-β-环糊精作为手性流动相添加剂，考察炔诺孕酮在大鼠皮肤渗透中的立体选择性行为[6]；刘铁钢等采用γ-CD 键合固定相测定左炔诺孕酮的光学纯度[7]，Chankvetadze B等还对毛细管电色谱和毛细管液相色谱测定左炔诺孕酮药物及制剂的对映体纯度进行了比较[8]。本文采用CHIRALPAK IC手性柱，通过优化色谱条件，建立了一种可分离左炔诺孕酮及其右旋异构体的手性固定相高效液相色谱法，同时，对国内主要生产厂家的15个批次的原料及制剂进行了右旋异构体杂质检查。 图1 左炔诺孕酮化学结构式