有机磷多肽缩合试剂DEPBT的合成.docVIP

实验十六 多肽缩合试剂DEPBT的 DEPBT1,2 [3-(二乙氧基磷酰氧基-1,2,3-苯并三嗪-4-酮3-(diethoxyphosphoryloxy)-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-one]是近年来由我国科学家发展的一种反应条件温和，底物氨基酸侧链羟基、咪唑基等官能团不用保护3,4，产物消旋率低的含磷多肽缩合试剂5。它被广泛用于生物活性多肽及其类似物的合成(Aldrich已将其商品化)6。 本实验的目的1) 进一步熟悉查阅有机合成文献的方法；2) 培养设计、完成与总结多步有机合成实验的能力；3) 着重复习与提高减压蒸馏、重结晶的实验方法和技巧；4) 了解多肽合成的相关知识。 二、A 试剂与药品 溶剂：无水甲醇 500mL, 普通甲醇 500mL, 无水乙醇 500mL, 普通乙醇 500mL, 乙酸乙酯 500mL(3, 石油醚(30-60℃)500mL(4, 无水苯 500mL(2，二氯甲烷 500mL，普通乙醚500mL(5。 药品：邻氨基苯甲酸 50g，亚硝酸钠 25g，盐酸羟胺 50g， 三氯化磷 250mL, 二氯亚砜 250mL, 磺酰氯 250mL, 三乙胺 250mL, 浓盐酸 250mL, 氢氧化钠 250g, 碳酸钠 250g, 无水硫酸钠 500g, 食盐 2000g。 以上试剂与药品为一个实验小组(20人)用量。 B 仪器与设备 旋转蒸发仪(1-2台)，电磁搅拌器(20台)，电热套 (20套)，有机实验常用玻璃仪器(20套)， 减压蒸馏装置(5套)，机械泵(5-10 mmHg 真空度，3台)，循环水泵(2台)，气流烘干器(1台)，熔点仪(1台)，红外光谱仪(送样测试)。 实验步骤 讲解实验内容与要求；查阅文献拟定合成方案。 指导教师讲解实验内容与要求；介绍有机化学实验的安全注意事项以及安全防护的基本知识；介绍使用图书馆、网络资源和化学专业数据库查阅合成文献的方法。学生在阅读实验目的和查阅所列参考文献的基础上拟定实验方案。在完成本单元的实验后，请同学递交以下材料： DEPBT的合成路线； DEPBT的熔点值、核磁共振与红外表征数据； DEPBT在Aldrich出售的价格； d) 利用美国化学会数据库查阅使用DEPBT做为缩合试剂的文献。 实验方案可行性讨论；合成邻氨基苯甲酸甲酯。 对实验单元1递交的材料进行讨论，确定最终的实验方案。实验路线图如下： 本以下 邻氨基苯甲酸甲酯(化合物1)的合成如下：20mL无水甲醇，用冰盐浴冷至(10℃，缓慢滴入4.7mL氯化亚砜，加完后继续搅拌20分钟。加入邻氨基苯甲酸2.5g, 室温搅拌半小时，然后加热回流至固体溶解呈玫瑰红澄清溶液，继续反应2h。用旋转蒸发减压除去溶剂得到大量固体，用饱和碳酸钠溶液溶解，调节pH至8，此时有玫瑰色油析出，用乙醚提取(25mL(2)，无水Na2SO4干燥，除去溶剂后得液体产物邻氨基苯甲酸甲酯(化合物1)。 3．合成3-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4-酮(HODhbt)，重结晶纯化。 0℃下将2.5克盐酸羟胺缓慢加入18mL 4N的NaOH溶液中，搅拌至溶解。往此溶液中加入2.7g邻氨基苯甲酸甲酯和12mL甲醇，室温反应60h。减压浓缩至三分之一体积时有沉淀析出，过滤，沉淀用乙醚充分洗涤(10mL(3)，滤液用浓盐酸酸化至pH为1，放置，有固体析出，过滤，将两部分固体合并溶于36mL 1N盐酸中，冷却至0－5℃，于搅拌下滴加0.96g亚硝酸钠在3.0mL水中的溶液。室温反应45分钟后过滤得到微黄色固体，乙醇重结晶得到白色晶体(化合物2)。Mp. 178-180℃ (文献值)。 4．合成二乙氧基磷酰氯，减压蒸馏纯化产物，（本反应为两人一组）。 17mL 无水苯与11.7mL 无水乙醇混和后冷却至8－10℃，在此温度下滴入5.8mL PCl3 与17mL 苯的混和溶液，加完后搅拌1h。在8－10℃下继续滴入5.4mL SO2Cl2与17mL苯的混和溶液，室温反应过夜，浓缩后减压蒸馏，收集主要馏分，得到二乙氧基磷酰DEPBT， 重结晶纯化。 将0.82gHODhbt溶于3mL 二氯甲烷及0.77mL三乙胺中，在冰浴冷却下，滴加0.95g二乙氧基磷酰0.5mL)，加入石油醚得晶体产物DEPBT。 测定所得产物DEPBT(化合物4)的熔点和红外光谱，并将其与文献值对照。 6．总结。 学生计算各步反应的产率和总产率，撰写实验报告。集体讨论多步有机合成实验的体会与收获，选择部分同学就减压蒸馏、重结晶、旋转蒸发等实验操作进行代表性发言。指导教师对本实验进行总结，解释DEPBT的熔点和红外光谱数据，并就