高效液相色谱法测定糙米粉中的维生素.pdfVIP

高效液相色谱法测定糙米粉中的维生素 吴红京 唐根源 王 勇 （中国科学院福建物质结构研究所 福州 350002 福（建药品检验所 福州 350001） 2.4.2 脂溶性维生素 6.0000g糙米粉置于回流 1 前言 瓶中，依次加入乙醇 无（醛）100mL50％KOH溶液 众所周知，糙米粉有很高的营养价值，含有人体 30mL，抗坏血酸0.68g，加热皂化回流30min，用 必需的多种维生素。用高效液相色谱法 H（PLC）和 30mL乙醚萃取3次。醚层经水洗至不呈碱性，合并 薄层色谱法 T（LC）分析植物材料[1]、牛乳[2,3]、食 后的醚层用装有无水硫酸钠的漏斗过滤到旋转蒸发 品[4、药物[5]等样本中水溶性和脂溶性维生素已有 瓶中，于45℃水浴旋转蒸干，立即用10mL无水乙醇 报道。我们采用不同的处理样品方法，用同一根反相 溶解定容，离心后，经0.45m滤膜过滤，用作色谱分 柱来分离水溶性和脂溶性维生素，该法较其他方法 析 见（图2，表1。 更为简单、快速、准确，分离效果好，重现性好。另外， 本实验还对各种分离条件进行了探索性的研究。 2 实验部分 2.1主要仪器与试剂 见文献[6]。 2.2色谱分离条件 2.2.1 水溶性维生素 色谱柱：-BondapakC18 3.9mmi.d.×300mm；保护柱：PermaphaseC1837～ 44μ蹋4.6mmi.d.×5.0cm；流动相：甲醇 水∶ 含（Pic B65mmol/L，冰醋酸1％ィ，三乙胺0.12ィ，pH3.27） 21 78检测波长 ∶紫外272nm 流速梯度：0 15min；柱温 45℃妗。 2.2.2 脂溶性维生素 色谱柱：同2.2.1项；流动 相：甲醇 ∶水＝955检测波长：紫外290nm；流速： 1mL/min；室温。 2.3相关系教与最低检测限 详见文献[6]。 2.4样品处理与结果 2.4.1 水溶性维生素 6.0000g糙米粉置于100mL 容量瓶中，用0.1mol/L盐酸70mL在沸水浴中浸提 2.5 回收率的测定 30min，并用稀盐酸定容，取少量上层溶液高速离心， 在糙米粉中加入已知量的维生素标样，按分析 使用前经0.45μ蘭m滤膜过滤两次，用作色谱分析 见（ 步骤处理样品，测定回收率 见（表2。 图1，表1。 本文收稿 日期：1995年2月25日．修回日期:1995年6月27日 表1样品测试结果 5在流动相中添加三乙胺是为了减少碱性维 生素的峰拖尾。 6流动相的pH值对叶酸的保留时间影响较 大，当pH3.6时，V1和叶酸两峰重叠。 7）流速梯度可改善各种维生素间的分辨率，并 可使基线平稳。 表2 回收率 3 讨论 1）测定维生素的报道虽然很多，但可同时完全 分离8种水溶性维生素的报道并不多见。本方法介绍 了同时分离8种水溶性维生素的各种条件，分离效果 好，一次分析只需二十几分钟即可完成。 2）采用本法皂化提取后的样品，不须经预柱处 理，定容时不必转移，因此可减少损失。试验时，在同 关键词 高效液相色谱法，维生素，糙米粉 一根反相柱上，只需简单地更换不同组成比例的流 动相，变换检测波长，就可按需要测定水溶性或脂溶 参 考 文