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* * 胚 胎 工 程 胚胎发育的过程及体外受精和早期胚胎的培养 1.胚胎发育的过程。 2.体外受精。 (1)原理:人工模拟体内环境(包括营养、温度、pH等),使初级卵母细胞成熟和精子获能,最终完成受精和胚胎保存。 (2)主要操作步骤: ①卵母细胞的采集: 方法一:对小型动物一般采用促性腺激素处理,排卵后直接从输卵管中冲取卵子直接与获能的精子在体外受精。 方法二:对大型动物一般采用从活体的卵巢中吸取卵母细胞,经体外人工培养成熟后与获能的精子在体外受精。 ②精子的采集和获能: 采集方法:假阴道法、手握法和电刺激法等。 获能方法:培养法和诱导法。 ③受精:获能精子和成熟卵子在共同培养一段时间后便可受精。 3.早期胚胎的培养。 (1)培养液成分:盐类,包括无机盐和有机盐;营养物质;蛋白质的组成单位氨基酸;DNA和RNA的组成单位核苷酸;调节物质有维生素、激素;特有物质有血清。 (2)胚胎移植时间:不同动物其胚胎移植的时间不同。牛、羊要培养到桑椹胚或囊胚阶段,小鼠、家兔在桑椹胚前,人胚胎可在4个细胞阶段移植。几乎所有动物都不能到原肠胚阶段移植,因为此时分化程度高,移植成功率很低。 (3)胚胎发育到适宜阶段时,既可向受体移植,也可冷冻保存。 ?特别提醒: (1)要注意区分受精的标志和受精过程结束的标志。受精的标志是卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体,受精过程结束的标志是雌、雄原核融合成合子。 (2)受精过程中有三大反应(作用):顶体反应、透明带反应、卵黄膜封闭作用。三大反应(作用)的作用不同:顶体反应主要是形成精子穿越放射冠的通路;透明带反应是防止多精子入卵受精的第一道屏障;细胞膜反应则是防止多精子入卵受精的第二道屏障。 (3)动物排出卵子的成熟程度不同,有的可能是次级卵母细胞,如猪、羊等;有的可能是初级卵母细胞,如马、犬等,但它们都要在输卵管内进一步成熟,当达到减数第二次分裂的中期时,才具有与精子受精的能力。 (4)胚胎早期培养过程中有两次用到了显微镜进行检查:①在进行卵母细胞成熟培养前,要抽取卵母细胞在显微镜下检查并挑选;②胚胎培养前要用显微镜检查受精卵。 【例1】 下图表示哺乳动物胚胎发育过程的几个阶段,下列相关描述正确的是( ) A.图中3是透明带,7是原肠腔 B.发育的先后顺序是甲→丙→乙 C.1部位细胞将来发育成胎儿的各种组织 D.甲、乙、丙时期的细胞都具有发育的全能性 解析:图中甲是桑椹胚,乙是囊胚,丙是原肠胚。图中1是滋养层,2是内细胞团,3是透明带,4是囊胚腔,5是外胚层,6是滋养层,7是原肠腔,8是内胚层。内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。 答案:A 规律总结 有关体内受精与早期胚胎发育的辨析 (1)对卵裂阶段物质含量和体积大小的变化模糊不清 ①误认为卵裂阶段的细胞分裂方式包括减数分裂,实际上只有有丝分裂。 ②误认为卵裂阶段细胞中有机物、DNA的含量要增多,细胞体积要增大。从受精卵到囊胚阶段总体积不变或略有减小,但细胞数目增多,所以每个细胞体积减小;伴随细胞分裂,细胞数目增多,总DNA含量增多,但每个细胞中DNA含量保持相对稳定;该过程中有机物总量减少,因为一直呼吸消耗但不从外界吸收。 (2)对排卵理解不准确:排卵是指卵子从卵泡中排出,而不是卵泡从卵巢中排出。 (3)混淆受精标志与受精完成的标志。 受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体;而受精过程完成的标志是雌、雄原核的融合。 (4)不能对胚胎发育与胚胎工程中的有关概念进行正确区分。 ①对精子和卵子的发生、发育及结合场所不熟:精子发生场所——睾丸的曲细精管;卵子的发生场所——卵巢;受精场所——输卵管;受精卵发育场所——输卵管和子宫;精子发生的时间及特点——初情期后,两次分裂连续进行;卵子发生的时间及特点——胚胎性别分化以后,两次分裂不连续进行。 ②对囊胚和桑椹胚在胚胎发育过程中所处的阶段、特点和在胚胎工程中的应用没有完全掌握:胚胎发育过程中开始分化的阶段是囊胚,可以移植或分割的阶段为桑椹胚和囊胚。 ③忽略“透明带反应”和“卵细胞膜反应”在受精过程中的生物学意义:两者构成了防止多精入卵受精的两道屏障。 ④体外受精易忽视“精子获能”和“卵子成熟”问题。 跟踪训练 下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述,正确的是( ) A.采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B.排卵就是排出成熟卵细胞的过程 C.卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成 D.卵子受精完成的标志是在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体 解析:采集到的精子必须经获能处理后才能受精,采集的卵细胞需要培养成熟后才可与获能的精子受精;初级卵母细胞的减数第一次分裂是在雌性动物排卵前后完成的,其结果产生一个次级卵母细胞和
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