高效液相色谱法检测邻烯丙基苯酚在小麦纹枯病菌中降解动态.pdfVIP

第36卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告 第5期 Chinese of 637—641 2008年5月 JournalAnalyticalChemistry 高效液相色谱法检测邻烯丙基苯酚 、在小麦纹枯病菌中降解动态 曲田丽1’2 孟昭礼2 李健强“ 1(中国农业大学农学与生物技术学院，北京100094)2(青岛农业大学院植保学院，青岛266109) 摘要采用高效液相色谱-二极管阵列(HPLC-DAD)检测方法定量分析仿生杀菌剂邻烯丙基苯酚在小麦纹 BDS lnlnx4．6Ill／n 枯病菌中的降解情况。检测条件为：流动相为乙腈／水(0．1％醋酸)，HYPERSILC。8(250 i．d．，5岬)色谱柱，检测波长280 在2—500mg／L浓度范围内线性关系良好。检出限和定量下限分别为0．15和2．00 mg／L；平均回收率为 72．63％。所建立的分析方法灵敏、准确，并且具有较好的稳定性和重现性，可以用于邻烯丙基苯酚在小麦纹 枯病菌中消解动态的定性定量分析。检测0～144h内邻烯丙基苯酚在小麦纹枯病菌培养液中的降解情况， 0—8h问邻烯丙基苯酚在培养液中迅速降解，至8h时药物的降解率达到47．13％。此后，邻烯丙基苯酚呈平 稳的递减趋势，在144h药物已消解71．02％。此过程中药物对病菌菌丝生长的抑制作用并未因其降解而降 低，而是呈现较平稳的抑菌势态。 关键词高效液相色谱．二极管阵列，邻烯丙基苯酚，小麦纹枯病菌，降解动态 1 引 言 近年来，有关农药在环境中的代谢降解、测定和控制农药及其代谢物残留方面的研究，已成为农药 学的研究热点之一。农药在微生物、植物及土壤中的代谢降解途径、代谢率及分布的信息可以为一种新 型农药开发利用提供活性及毒性方面有价值的数据。其研究主要分布于两个领域：一为研究药剂对非 靶标生物的影响，通常属于环境毒理学的研究范畴；另一种作为农药作用机制研究的一个环节，以研究 靶标生物的抑菌机制、抗性机制及选择性机制为目的。 本研究所选用的杀菌剂邻烯丙基苯酚是我国自主研制的新型仿生合成类农用杀菌剂。田间试验研 究表明，该药剂对小麦纹枯病、苹果腐烂病和番茄灰霉病具有良好的防治效果。．同时室内毒力测定结果 亦显示，该药剂对小麦纹枯病菌的抑菌效果尤为显著。目前，关于邻烯丙基苯酚的合成与产业化、应用 技术与效果、田间药效与毒性、残留等工作已逐步展开，其药理学行为、抑菌机制及环境毒理学等方面的 研究也已取得阶段性进展【l“】。张龙等1以小麦幼苗为对象，指出邻烯丙基苯酚是一种具有内吸和自 基向顶传导作用的杀菌剂，证明该药剂的内吸传导是一种受体植物主动吸收的过程。作者采用HPLC． DAD(photodiodedetector)检测技术证明了该药剂在小麦幼苗中自顶向基的传导作用旧J。结合以 array 上两项研究结果，可以初步证实邻烯丙基苯酚在受体植物小麦中具有双向传导的特性。本研究以小麦 纹枯病菌为靶标菌，采用HPLC—DAD检测方法，定性定量地分析了邻烯丙基苯酚在小麦纹枯病菌中的 消解动态，同时，测定药物对靶标菌的抑制作用，解析药物降解与其抑菌作用之间的关系，初步阐述该杀 菌剂的作用机制。 2 实验部分 2．1材料和仪器 邻烯丙基苯酚标准品(含量199％)由山东省莱阳农学院农药仿生应用工程技术研究中心提供。 小麦纹枯病菌(Rhizoctoniacerealis)，由中国农业大学种子病理及杀菌剂药理研究室提供。乙酸乙酯、甲 醇为分析纯(北京化工厂)；PDA培养基(马铃薯200 g，葡萄糖20g，琼脂粉10g)；YG培养液(酵母浸