巨噬细胞游走抑制因子通过PI3K／Akt信号通路调控人结肠癌细胞株HT-29增殖和血管生成因子表达.pdfVIP

· 136· ChinJGastroenterol，2009，Vo1．14，No．3 巨噬细胞游走抑制因子通过 Pl3K／Akt信号通路调控 人结肠癌细胞株 HT．29增殖和血管生成因子表达水 李国庆 刘艳萍 冯 霞 雷小勇z 张 硎 - 南华大学附属第二医院消化 内科 ’(421001) 南华大学生命科学与技术学院 背景 ：巨噬细胞游走抑制因子(MIF)是一种多功能细胞因子，其在结直肠癌发生、发展 中的作用机制 尚不 明确 。 目的：探讨 MIF是否通过 PI3K／Akt信号通路调控人结肠癌细胞增殖和血管生成 因子表达 。方法 ：人结肠癌细胞株 HT一29分为对 照组 (RPMI一1640)、重组人 MIF(rhMIF)组 、PI3K抑制剂 LY294002组和 LY294002预处理联合 rhMIF 组 ，并予相应干预 。以甲基噻唑基 四唑(Mrr)法检测 HT一29细胞增殖状态，分别 以逆转录聚合酶链反应 (RT．PCR)和 酶联免疫吸附测定 (ELISA)检测血管 内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-8(IL培)mRNA表达和蛋 白分泌，蛋 白质 印 迹法检测Akt和磷酸化 Akt(p．Akt)蛋 白表达 。结果 ：rhMIF对 HT一29细胞具有促增殖作用 ，能增加细胞 VEGF、IL．8 mRNA表达和蛋 白分泌，并促进 Akt蛋 白磷酸化(P0．05)；而先予 LY294002预处理可显著抑制rhMIF的上述作用 ， HT-29细胞增殖显著受抑 (P0．05)，VEGF、IL一8mRNA表达 、蛋 白分泌以及 p-Akt蛋 白水平与对照组相 比无 明显差 异。各组总 Akt蛋 白水平均无 明显差异。结论 ：MIF诱导人结肠癌细胞增殖和血管生成因子表达可能是通过活化 PI3l，√Akt信号通路实现 的 关键词 巨噬细胞游走抑制 因子 ； 结肠肿瘤 ； 细胞增殖 ； 血管 内皮生长因子类 ； 白细胞介素 8： 1一磷脂酰肌醇 3一激酶 Macrophage M igration Inhibitory Factor Regulates Proliferation and Expression ofAngiogenesisFactor via PI3K／AktSignalPathwayinHumanColonCancerCellLineHT-29 L1Guoqing, LIU Yanping, FENGXio, LEI Xiaoyong,ZHANGLi．DepartmentofGastroenterology,TheSecondAffiliatedHospitalofUniversityofSouthChino, Hengyang,HunanProvince(421001J Background： Macrophagemigrationinhibitoryfactor (MIF) isamuhifunctionalcytokine，itsmechanism inthe genesisanddevelopmentofcolorectalcancerhasnotbeenclarified． Aims： ToinvestigatewhetherMIFregulatesthe proliferationofhumancoloncancer(：ellsandexpressionofangiogenesisfactorviaPI3K／Aktsignalpathway． Methods： TheculturedhumancoloncancercelllineHT一29wastreatedwithRPMI一1640 fcontrolgroup) recombinanthumanMIF (rhMIF)，PI3KinhibitorLY294002andLY294002pretreatingaddedwithrhMIF，respectively．Methylthiazolyltetrazolium fMrITr) assaywasusedtomeasuretheproliferationofHT一29cells．ThemRN