技术方法百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立.pdfVIP

2011;31(9) 南方医科大学学报（J South Med Univ ） ·1509 · ·技术方法· 百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法的建立及应用 马 强，林冠峰，邹丽萍，李 明，吴英松 南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所，广东 广州 510515 摘要：目的建立铕(Eu3+)标记检测百日咳毒素S1亚基蛋白时间分辨免疫荧光分析法。方法 利用原核重组表达系统表 达百日咳毒素S1亚基蛋白，并鉴定，采用双抗体夹心法建立检测S1 TRFIA 分析方法。结果 自制S1试剂盒检测灵敏度 2.5 ng/ml ，与其他抗原无交叉反应，并初步可应用于百日咳疫苗中免疫原的监测。结论 自制百日咳毒素S1亚基蛋白时 间分辨免疫荧光分析法能够较为可靠的监控百日咳疫苗质量。 关键词：百日咳；S1亚基；时间分辨免疫荧光分析法 中图分类号：R378.42 文献标志码：A 文章编号：1673-4254（2011）09-1509-04 Development of a time-resolved fluoroimmunoassay for detecting S1 subunit of pertussis toxin and its application MA Qiang, LIN Guan-feng, ZOU Li-ping, LI Ming, WU Ying-song Institute of Antibody Engineering, School of Biotechnology, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China Abstract: Objective To develop a time-resolved fluoroimmunoassay (TRFIA) for detection of pertussis toxin (PT) S1 subunit for quality control of human PT vaccine. Methods A double antibody sandwich one-step method was used to establish the TRFIA for detecting PT S1 subunit in the vaccine. Results The sensitivity of c peptide analysis reached 2.5 ng/ml without cross-reactions with other antigens. This assay could be used in detecting S1 subunit in the vaccine. Conclusion The TRFIA for detecting PT S1 subunit is simple, sensitive and rapid for quality control of the PT vacccine. Key words: Bordetella pertussis; S1 subunit; time-resolved fluoroimmunoassay 百日咳是由百日咳杆菌（bordetella pertussis ，BP) 稳定性提供较为可靠的检测手段。 引起的一种急性呼吸系统传染病，严重威胁婴幼儿的健 ［1］ 康 ，接种疫苗是预防该病的有效手段。在百日咳杆菌 1 材料与方法 产生的诸多生物活性蛋白中，百日咳毒素(pertussis 1.1 实验材料 ［2］ toxin, PT)是唯一不受争议的保护性抗原 ，也是各种无 菌