人脐带间质干细胞的CMDil标记及其移植在急性肾损伤大鼠体内示踪研究.docVIP

第２２卷第３期  江苏大学学报（医学版）  Ｖ０１．２２  Ｎｏ．３ ２０１２年５月 Ｊｏｕｍａｌ ０ｆ Ｊｉａ“ｇｓｕ Ｕｍｖｅｒｓｉｔｙ（Ｍｅｄｊｃｉｎｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｍａｖ ２０１２  人脐带问质干细胞的ＣＭ—Ｄｉｌ标记及其移植在急性肾损 伤大鼠体内的示踪研究 徐会涛，周颖，王冰莹，毛飞，徐会娟，许文荣，朱伟，钱晖 （江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江２１２０１３）  ［摘  要］  目的：探讨人脐带间质干细胞（ｈｍ¨ｍｂｉｌｉｃａｌ  ｃｏＩｄ ＩＩｌｅ∞ｎｃｈｙｒｒＩａｌ ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ，ｈｕｃＭｓｃ８）用ｃＭ—ＤｉＪ染料标 记之后生物学特性及体内定位示踪情况。方法：采用脐带组织块贴壁培养法分离人脐带间质于细胞，用ｃＭ 标记第３代ｈｕｃＭｓｃｓ；采用细胞计数法分析ｃＭ－Ｄｉｌ标记后ｈｕｃＭｓｃｓ的生长变化情况；通过活体成像仪观察ｃＭ—ＤｉＩ染 料标记的ｈｕｃＭｓＣｓ移植于急性肾损伤大鼠后的体内定位。结果：ｃＭ—Ｄｉｌ染料标记ｈｕｃＭｓｃｓ的效率很高；标记后的 ｈｕｃＭｓｃ８生长增殖能力没有发生明显变化；体内示踪可以观察到标记的ｈｕｃＭｓｃ８。结论：ｃＭ—ＤｉＩ标记不影响ｈｕｃＭ． Ｓｃｓ的生长增殖特征，并且能够在体内示踪，为后续研究提供了实验基础。 ［关键词】人脐带间质干细胞；ＣＭ—Ｄｉｌ染科；体内示踪；急性肾损伤 ［中图分类号］ Ｒ３３ ［文献标志码］ Ａ （文章编号］ １６７ｌ一７７８３（２０１２）０３—０２０９一０４  Ｈｕｍａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｎｓ ｌａｂｅｌｅｄ ｗｉｔｈ  ＣＭ－Ｄｉｌ  ａｎｄ ｔｒａ璐ｐｌａｎｔｅｄ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｌ【ｉｄｎｅｙ ｉｎｊｕｒｙ ｒａｔｓ ｆｏｒ ｔｒａｃｅｒ ｓｔｕｄｙ  Ｘ￡，肌ｉ一拗，Ｚ肋Ｕ‰ｇ，珊Ｇ Ｂｉ昭咖ｗ，删Ｏ ｎｆ，删’舭ｉ０眦，ｌ，  （ｓｃｈｏ。工ｏｆＭｅｄｉｃ曩ｌ ＸＵ Ｗｅｎ－ｒｏｌ喀，ｚＨＵ Ｗｅｉ，ＱｌＡＮ Ｈｕ主 ｓｃｉ曲ｃｅ蛐ｄ Ｌ丑ｂ０咖Ｍｅｄｉｃ沁，Ｊｉａｎ固ｍＵｎｉｖｅ均姆，ＺｌｌｅｎｊｉＢ哩Ｊｉａｎｇ哪２１２０１３，ＣｈｉＭ）  ［Ａｂｓｔ船ｃｔ］  ｏｂｊｃｃｃｉｖｅ：Ｔｂ ｉｎｖｅｓｔ噜ａｔｅ ｗｈｅｔｈｅｒ ｔｈｅ  ｃｈ锄ｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ  ｏｆ ｈｕｍｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｍｅ∞ｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ（ｈｕｃＭＳＣｓ）ｌａｂｅｌｅｄ证ｔｈ ＣＭ．Ｄｉｌ ｗｉｌｌ ｂｅ ｃｈａｎｇｅｄ；ａｎｄ ｉｆ ＣＭ，Ｄｉｌｌａｂｌｅｄ ｈｕｃＭＳＣｓ ｃａｎ ｂｅ ｔｍｃｅｄ流 疵矽．ＭｅｔＩｌｏｄｓ：ＨｕｃＭＳＣｓ Ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆＩ．ｏｍ ｈｕｍ卸ｕｍｂｊｌｊｃａｌ∞ｄ．１１１ｅ ｈｕｃＭＳＣｓ ｏｆ ｐａ掘ａｇｅ ３ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃ￡ｅｄ ｆｏｒ ｌａｂｅｌｉｎｇ讯础ｒ０．Ｕｓｉｎｇ ｃｅｕ ｃｏｕｎｔｉ“ｇ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ａｎａｌｙ∞ｇｒｏｗ【ｈ ｃｕｒｖ船０ｆ ＣＭ—Ｄｉｌ ｌａｂｅｌｅｄ ｈｕｃＭＳＣｓ；ｏｂ－ ∞ｎ，ｅｄ ＣＭ．Ｄｉｌｌａｂｅｌｅｄ ｈｕｃＭＳｃｓ抚咖丽ｔｈ ｉ姗瞬ｒＩｇ ｉｎｓｔｎｌｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：１ｈｅ娟ｃｉｅｎｃｙ ０ｆ ＣＭ．Ｄｉｌ ｄｙｅ—ｌａ－ ｂｅｌｅｄ ｈｕｃＭＳＣｓ ｗ鹄ｈｉ小．卟ｅ ｐｒｏｌｉｆｅｍｔｉｏｎ ｏｆ ｌａｂｅｌｅｄ ｈｕｃＭＳＣｓ ｈａｄ ｎｏ ｏｂｖｉｏｕ８ ｃＩＩａｎ孵．ＣＭ．Ｄｉｌ ｄｙｅ．１ａｂｅｌｅｄ ｈｕｃＭＳＣｓ ｃ锄ｂｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ访ｚ面∞．ＣｏｎｃＩｕｓｉ∞：ＣＭ．Ｄｉｌ ｌａｂｅｌｅｄ ｈｕｃＭＳＣｓ ｃ锄ｂＨｅ ｔｍｃｅｄ讥娩ＩＤ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ ｈｕｃＭＳＣ８；ＣＭ—Ｄｉｌ；ｔｍｅｅ ｉｎ砌；ａｃｕｔｅ ｋｉｄｎｅｙ ｉｎｉｕｒｙ  目前，问质干细胞移植治疗各种器官损伤是国 内外各实验室与临床研究的热点，以骨髓分离的间 质干细胞为主要来源。近年来研究表明，从脐带中 也可分离得到问质干细胞…，且与骨髓间质干细胞 相比具有一定优越性Ｂ１，如更高的增殖潜能、分化 能力和基因转染效率ｐ１，更低的免疫原性，来源广 泛，容易获取，不受任何伦理及法理的限制等。因 此．脐带间质干细胞有望替代骨髓闯质干细胞成为 细胞治疗的理想种子细胞。  间质干细胞移植后的体内示踪、趋向性及归 巢是移植机制研究中亟待解决的关键问题，而目 前对干细胞移植示踪研究的有效方法较少。为 此，本实验采用一种新的细胞膜荧光染料ＣＭ—Ｄｉｌ 标记人脐带问质干细胞，并体外传代培养，观察标 记效率；同时，将标记的