抗嵌合抗体的表达与活性检测.pdfVIP

中国生物工程杂志 ， ， （）： $H;98 ;E:LOH9EQE.R ? ? # =G S = $$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$ !!!!!!!!!! ! 研究报告 ! ! !!!!!!!!! 抗 !#$ 嵌合抗体的表达与活性检测 # 师明磊 胡显文 陈惠鹏 高丽华 李世崇 （军事医学科学院生物工程研究所 北京 !#!） 摘要 表达了基因重组抗$% 嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定。设计合成轻、重链 可变区序列；提取血液 ，通过 得到人 、 的轻、重链恒定区序列。运用重叠延伸 ’() ’*+,$’ !-./! ,$’，连接可变区与恒定区，将轻、重链基因连接至0-’12 双表达载体。将质粒以阳离子脂质体转 染 细胞， 挑选阳性克隆，共获得 株表达较高的克隆，表达量约为 。扩大培养阳 $34 15-2) # 6.7 5 性克隆 ，收获上清，以蛋白 进行亲和层析纯化表达蛋白。 检测表明纯 89:;+$%+!= ) 2%2+,)/1 化纯度达到 ，蛋白相对分子量与理论值吻合。以 A 细胞 、 、 检测，表明 ? @ $% ’8B; %8CD; ’86ECF 该抗体能与$% 抗原特异性结合，体外杀伤试验说明抗体能够杀伤$% A 淋巴瘤细胞。 关键词 非霍奇金淋巴瘤 $% 单克隆抗体 嵌合抗体 非霍奇金淋巴瘤 （ ’ ， 载体 （ ）。 感受态大肠杆菌 9E9+3ED.P;9 F QR60HE68 0-’12 $QE9:LOH %3? (35）是最常见的血液系统恶性肿瘤，也是发病率增 （ ）、 酶、 酶、 连接酶、 多聚 %EC0FE9 *8[ ,RNE\LF: %() *G 长最快的恶性肿瘤之一，我国每年约有= S G 万人死 核苷酸激酶 （ ）、限制性内切酶 、 、 *G ,(W !# - !# -- 于该病。目前的放、化疗对(35 有部分疗效而副作 、 均为 产品，限制性内切酶 $%’ () - *8W8’8 用极大，因此研制更加高效低毒的药物很有意义。 、 、 、 为 公司产品。质粒 *+$ - ,#-. - /01 - /-2 - (1 患者中，约 是 细胞淋巴瘤，而 (35 T?@ S @ 提取、 产物回收、酶切产物回收分别采用 ,$’ 是 淋巴细胞和 淋巴瘤细胞表