雌激素对大鼠心肌缺血性损伤的保护作用.docVIP

成绩： 山东大学医学院 机能学试验设计 题 目：雌激素对大鼠心肌缺血性损伤的保护作用 设 计 者：包扬 韩觉明 姜志超 李俊伟 专 业：临床医学（七年制） 班 级：2006级3班 联系电话 2009 年 6 年 1 日 立题依据（主要说明本研究的目的、意义、国内外研究现状及主要参考文献） ① 目的：在大鼠缺血性心肌梗塞模型的基础上，通过去除大鼠卵巢或外源性雌激素的注射，分析雌激素对大鼠心肌缺血性损伤的保护作用。 ② 意义：冠心病及其衍生的缺血性损伤是当今大多数发达国家和部分发展中国家人群的首要死因。而在女性中，随着绝经年龄的到来，冠心病发病率及心肌缺血性损伤的死亡率戏剧性的增加，这暗示着雌激素对于心肌缺血性损伤具有保护作用，特别研究已证实雌激素可通过EPC（内皮祖细胞）的增殖，动员，归巢，分化来改善心肌供血状况，改善整体心功能。雌激素介导EPC对缺血性心脏病的保护作用或许即将成为一种极具价值的治疗途径。本实验重点探讨雌激素干预后心肌缺血性损伤在心脏血流动力学，心电图，心肌组织HE染色病理分析等方面的改善。 ③ 国内外研究现状：雌激素可显著动员存在于造血干细胞和骨髓基质细胞提供的造血微环境中的EPC的增殖，并释放入外周血液。外周循环中的EPC将迅速归巢至靶组织，特别是缺血和血管损伤部位。雌激素可提高EPC的有丝分裂并分化为具有功能的血管，发挥修复血管内皮，促进血管新生，减少缺血面积，改善心肌供血，最终达到改善心脏功能的作用。目前临床已进行冠脉内自身EPC移植，可抑制心肌梗死患者心脏不可逆重塑的过程，安全又可行。 ④ 主要参考文献： 黄楷森，何顶秀，黄德嘉，《雌激素与冠心病——通过内皮祖细胞发挥有益作用》，心血管病学进展，208，6（29），858-861. 姚玉宇，马根山，刘巧丰，尹航，沈波，《急性心肌梗死后凋亡和炎症及相关因子的动态变化》，江苏医学，2008，12（34），1271-1273. 郑小璞，马爱群，韩克，刘宇，张炜，王锐，《雌激素对急性心肌梗死后去卵巢大鼠肝细胞和心功能的影响》，细胞与分子免疫学杂志，2006，3（22），350-352. 刘秋玲，孙远东，王晓哲，李鸣，白波，《雌激素对去卵巢大鼠缺血再灌注脑损伤的保护作用》，J Clin Neurol，2008，6（21），434-436. 鲁玉芬，孙士玲，《小剂量雌激素对绝经后女性冠心病心绞痛的影响》，中原医刊，2004，19（33），33-34. 实验材料（包括动物的品种、规格、数量和来源；药品的名称、规格和来源；仪器设备等） ① 动物：健康雌性SD大鼠40只，八月龄，质量280±10g ② 药品：3％戊巴比妥钠，雌二醇，青霉素粉及青霉素试剂，乌拉坦（200g/L），橄榄油，4%多聚甲醛，铁苏木素等病理染色试剂。 ③ 仪器设备：手术刀，“0/5”无损伤缝线，三通管，离心机，计算机BL-410系统。 试验方法（详细写明实验步骤，尤其动物分组、给药途径和剂量、观察指标及数据处理等） ① 动物分组及处理：将40只雌性大鼠随机分为4组，分别为假手术组（不切除卵巢+不进行心梗处理），心梗组（不切除卵巢+心梗处理），去卵巢心梗组（切除卵巢+心梗处理），雌激素干预组（切除卵巢+心梗处理+雌激素干预）. 具体操作如下： 切除卵巢：3%戊巴比妥钠腹腔麻醉大鼠，腹下部正中切口，摘除去卵巢心梗组、雌激素干预组两组大鼠双侧卵巢，假手术组和心梗组切除腹腔内脂肪1g，缝合. 术后第30天，雌激素干预组大鼠腹腔注射E210mg/隔天注射，持续30d。其他各组腹腔注射等量橄榄油。 心梗模型制作：大鼠吸入乙醚麻醉，仰位固定，左侧胸壁去毛，消毒，剪开皮肤及皮下组织，与第4肋间剪开胸腔，暴露心脏，剪开心包，挤出心脏，以“0/5”无损伤缝线于左心房下约1mm处结扎左冠状动脉前降支。可在左心室前侧壁及心尖部颜色变暗，呈苍白色，搏动减弱时，迅速将心脏放回胸腔，挤压胸腔的残余气体，闭胸，于伤口处涂抹青霉素粉，并于术后连续肌肉注射青霉素3d，防止感染。 ② 心梗一周后，测各组大鼠的心电图变化，给大鼠接上心电图电极，现将4个金属枕头分别插入四肢的皮下，然后将与导线相连的鳄鱼夹固定在金属针头上，连接对应关系为：左上肢接黄线，左下肢接黑线，右下肢接黑线（此地为地线），右上肢接红线，白线为胸导联线。可选择性地记录标Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ和aⅤR，aⅤL及aⅤF不同肢体导联的心电图。 ③ 心梗4周后，腹腔注射乌拉坦（200g/L）0.5g/L 100g体重。麻醉后游离右颈总动脉1cm左右，结扎