载脂蛋白E基因多态性在术后认知功能障碍中的作用.docVIP

载脂蛋白E基因多态性与认知损害 李国才 招伟贤 广东省中医院(广州中医药大学附二院)麻醉科polymorphism)及其在认知损害和POCD中的作用作一综述。 1认知损害及术后认知功能障碍 1.1 认知损害 认知损害主要包括轻度认知损害和痴呆。MCI的概念最早由Petersen[1]提出，是由于中枢神经系统退变所致的神经功能障碍，特点是多见于老年人，其病因不能由已知的疾病或精神障碍所解释，主要表现为记忆力减退、工作能力和效率下降、注意力集中减退、学习新事物能力下降，仍有相对正常的日常生活和认知能力。是介于正常老龄化和痴呆之间的一种过渡状态。严重认知损害则表现为痴呆（通常为阿尔茨海默病（Alzheimers disease，AD））[2]。 作者单位：510120 广州市，广州中医药大学附二院麻醉科 1.2 术后认知功能障碍及其影响因素 POCD的特点与轻度认知损害相似[3]，主要表现为手术后数d至数周 出现记忆力、精神集中能力、语言理解力的受损，社会适应能力下降。严重者也有发展为永久性的认知障碍，丧失独立生活的能力。POCD在接受心脏手术的病人中发生率为20%~60%，出院后，更高达50%~80%；在年龄超过60岁、接受非心脏手术的病人中，术后1周POCD的发生率为25%，在3个月后则降为10%，而对照组认知障碍的发生率仅为3%[4]。 影响POCD发生的因素较多，如手术、麻醉、年龄、术后感染、呼吸道并发症、二次手术、病人的受教育程度、围术期低血压、缺氧、术前精神健康状况、麻醉持续时间等，都可能与POCD的发生相关。而Biedler[5]则认为，年龄是POCD发生的危险因素，而术后早期的认知功能障碍又成为患者将来发生认知障碍的危险因素，而术中短暂低血压和低氧血症则不一定是POCD发生的危险因素。 2 载脂蛋白E及其基因多态性 2.1 生理作用 ApoE是一种分子量为37kDa（千碱基对）、含有299个氨基酸的多肽，它不仅在调节脂质代谢、维持胆固醇平衡方面起重要作用，同时也参与神经系统的正常生长与损伤后的修复过程，另外在抑制血小板聚集和肿瘤生长、免疫调节方面也有一定的作用。 2.2 合成及分布 ApoE主要由肝脏合成,其合成量约占血浆ApoE总量的2/3～3/4，肝实质细胞是肝脏合成和分泌ApoE的主要场所。脑组织中ApoE含量仅次于肝脏,主要由星型胶质细胞合成，神经元不合成ApoE。其他肝外组织也少量合成ApoE,如肾上腺、肾、睾丸、脾、骨骼肌、皮肤以及各种组织中的单核巨噬细胞等，小肠仅合成少量或不合成。在血浆中几乎所有的ApoE均与脂蛋白相连，ApoE主要分布于极低密度脂蛋白(VLDL)、高密度脂蛋白(HDL), 其中VLDL中的ApoE占血清总量的23%～36%，也分布于中间密度脂蛋白(IDL)、乳糜微粒(CM)及CM残骸[6]。 2.3 等位基因及基因多态性 与对立性状相对应的基因称为等位基因，它们在同源染色体上占有同样的位置，也就是占有相同的基因座位，其表达产物对于个体的生物学性状起重要作用。 人类ApoE基因位于第19号染色体的长臂(19q13)上，由4个外显子和3个内含子组成。该基因呈现多态性，由三种常见的等位基因:ε2、ε3和ε4编码产生三种ApoE异构体E2、E3和E4。根据推算的结果,3个等位基因在群体中出现的频率分别是E2:0.11、E3:0.72、E4:0.17[7]。大量的研究也证实, E3频率分布最高,被认为是ApoE等位基因的母体，E2和E4被认为是E3基础上单一核苷酸点突变的结果。不同国家，ApoE基因型及等位基因频率的分布不同,并有性别差异[8]。其多态性的分子基础源于第112位和158位单个氨基酸的替换。E2的这两个位置均为半胱氨酸(Cys)，E4的这两个位置均为精氨酸(Arg)，而E3的112位是Cys，158位是Arg。由于三种等位基因为共显性，因此由三种纯合子和三种杂合子组成的六种基因型即可表达产生六种对应的表型，即ε2ε2、ε3ε3、ε4ε4、ε2ε3、ε3ε4、ε2ε4。 2.4 基因分型方法 ApoE基因分型主要依赖于第4号外显子中出现的Hha-1酶切点在3个等位基因中的不同分布,并以此建立起了多聚酶链反应-限制性片段长度多态性基因分型（PCR- RFLP）的方法[9]。随着分子生物学技术的进步, DNA扩增技术的发展，PCR扩增已成为ApoE基因分型技术的核心。对ApoE基因序列扩增,其中含有112位和158位位点之间的编码序列，然后以寡核苷酸引物对基因序列扩增，扩增产物经Hha-1内切酶消化后,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳染色，通过分析不同长短的