细胞核与染色体课件.pptVIP

gp210：结构性跨膜蛋白 ?介导核孔复合体与核被膜的连接，将核孔复合体 锚定在“孔膜区”，从而为核孔复合体装配提供一个起始位 点 ?在内、外核膜融合形成核孔中起重要作用。 两段疏水区， C端:位于孔膜区，跨膜结构域 核周间隙内：核孔复合体组装开始时，发生构象改变，使其中的疏水区暴露，与核膜作用，诱导内外核膜的融合。 ?在核孔复合体的核质交换功能活动中起一定作用 p62：功能性的核孔复合体蛋白，具有两个功能结构域 ?疏水性N端区：可能在核孔复合体功能活动中直接参与核质交换 ?C端区：可能通过与其它核孔复合体蛋白相互作用，从而将p62分子稳定到核孔复合体上，为其N端进行核质交换活动提供支持。 1.通过核孔复合体的被动扩散 核孔复合体作为被动扩散的亲水通道。 实验证明？ 将聚乙烯吡咯烷酮（PVP）包被的胶体金颗粒，注射细胞质内，发现小分子物质能够以自由扩散的方式通过核孔进入细胞核。 扩散数率与分子大小成反比。 组蛋白，带本身信号序列的蛋白质，通过主动运输进入细胞核 与其他信号序列的成分结合，主动运输 例子： 带有放射性标记的完整核质蛋白、头、未片段（N、C端）分别注射非洲爪蟾卵母细胞中： 胶体金包被完整核质蛋白、尾部分别注射非洲爪蟾卵母细胞中： 结果：完整的核质蛋白、未片段能够在细胞核内迅速地积累，而头部却被拒之核外。 结论：信号序列在尾部 1982年R. Laskey发现核内含量丰富的核质蛋白(nucleoplasmin)的C端有一个信号序列，可引导蛋白质进入细胞核，称作核定位信号（nuclear localization signal，NLS）。 第一个被确定的NLS是病毒SV40的T抗原，它在胞质中合成后很快积累在核中。 其NLS为：pro-pro-lys-lys-lys-Arg-Lys-val，即使单个氨基酸被替换，亦失去作用。 NLS由4-8个氨基酸组成，含有Pro、Lys和Arg。 对其连接的蛋白质无特殊要求，并且完成核输入后不被切除。 Karyopherin是一类与核孔选择性运输有关的蛋白家族，相当于受体蛋白。 其中imporin负责将蛋白从细胞质运进细胞核， exportin负责相反方向的运输。 通过核孔复合体的转运还涉及Ran蛋白， Ran是一种G蛋白，调节货物受体复合体的组装和解体， 在细胞核内Ran-GTP的含量远高于细胞质。 （一）核质蛋白向细胞核的输入（通过核孔复合体的主动运输） 蛋白与NLS受体，即impotin α/β二聚体结合； 货物与受体的复合物与NPC胞质环上的纤维结合； 纤维向核弯曲，转运器构象发生改变，形成亲水通道，货物通过； 货物受体复合体与Ran-GTP结合，复合体解散，释放出货物； 与Ran-GTP结合的impotin β，输出细胞核，在细胞质中Ran结合的GTP水解，Ran-GDP返回细胞核重新转换为Ran-GTP； impotin α在核内exportin的帮助下运回细胞质。 (二）对细胞核向细胞质的大分子输出 大多数情况下，细胞核内的RNA是与蛋白质形成RNP复合物转运出细胞核的。 RNP的蛋白质上具有核输出信号（nuclear export signal, NES），可与细胞内的受体exportin结合，形成RNP-exportin-Ran-GTP复合体， 输出细胞核后，Ran-GTP水解，释放出结合的RNA，Ran-GDP、exportin和RNP蛋白返回细胞核。 二、核仁的功能 核糖体的生物发生相关 从核仁纤维组分开始再向颗粒组分延续 一、核仁形态 ①纤维中心(fibrillar centers，FC)：是被致密纤维包围的一个或几个低电子密度的圆形结构，主要成分为RNA聚合酶 I，rDNA和结合的转录因子，这些rDNA是裸露的分子。 ②致密纤维组分(dense fibrillar component，DFC)：呈环形或半月形包围FC，由致密的纤维构成，是新合成的RNP，转录主要发生在FC与DFC的交界处。 ③颗粒组分(granular component，GC)：由直径15-20 nm的颗粒构成，是不同加工阶段的RNP。 Nucleolus （一）核糖体的结构 含40%的蛋白质、60%的RNA，由两个亚单体构成。 分为70S和80S两种类型。 由大小两个亚基构成，只在以mRNA为模板合成蛋白质时才结合在一起，肽链合成终止后，大小亚单位又解离。 核糖体并不是单独工作的，而是由多个甚至几十个串连在一条mRNA分子上，称多聚核糖体（polyribosome）。 核糖体的组成 Protein Synthesis （二）核糖体组装 rRNA基因是重复的多拷贝基因。人的一个细胞中约有200个拷贝，rDNA没有组蛋白核心，是裸露的DNA节段，相邻基因