阻断PI3KAkt信号通路对低氧微环境中BCSCs微球体细胞增殖的影响.pdfVIP

36 　　肿瘤2013 年1 月第33 卷第1 期　TUM OR Vol. 33, J anuary 2013 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.01.006 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · 阻断PI3K/Akt信号通路对低氧微环境中BCSCs微球体细胞增殖的影响 1 1 1 1 1 1 2 屈洪波 ，韩明利 ，范原铭 ，曾　妮 ，朱之坤 ，吴诚义 ，汤为学 1. 重庆医科大学附属第一医院内分泌外科，重庆　400016 ；2 . 重庆医科大学病理生理学教研室，重庆　400016 [摘要]　目的：探讨 LY294002 特异性阻断磷脂酰肌醇 3- 激酶 （phosphatidylinositol 3-kinase ，PI3K ）/Akt 信号 �路对低氧条件下乳腺癌��� （breast cancer stem cells ，BCSCs ）微球体��增殖的影响。方法：�过无血清 悬浮培养�术从�乳腺癌 MCF-7 ��中筛选 BCSCs 微球体，应用免疫荧光染色检测 BCSCs 相关标志� CD44 及 CD133 的表达，MTT 法检测不 �浓度 LY294002 处理后 BCSCs 微球体�� 的增殖情况，RT-PCR 法检测 BCSCs 微球体��中缺氧诱导因子 -2α （hypoxia inducible factor-2α ，HIF-2α ） mRNA 的表达，蛋白质印迹法检 测 BCSCs 微球体��中 HIF-2α 、PI3K �磷酸化 Akt （phospho-Akt ，p-Akt ）蛋 白的表达。结果：筛选获得的 微球体��高表达 BCSCs 相关标志� CD44 � CD133 。LY294002 能有效抑制低氧条件下 BCSCs 微球体��的 增殖，抑制效应在药�作用后 72 ～ 96 h 最为明显 （ P ＜ 0.05 ）。与低氧组比较，低氧＋ LY294002 组微球体�� 中 HIF-2α mRNA 及 PI3K、p-Akt � HIF-2α 蛋白表达水�平�均明显下调，差异有统计学意义 （ P ＜ 0.05 ）。结论： LY294002 �过特异性阻断 PI3K/Akt 信号�路而有效抑制低氧条件下 BCSCs 微球体��的体外增殖能力。 [关键词]　乳腺肿瘤；细胞低氧；微球体；乳腺癌干细胞 [中图分类号]　R737.9 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2013) 01-0036-06 Effect of blocking the PI3K/Akt signalling pathway on cell proliferation of the aggregated breast cancer stem cells in microspheres under hypoxic microenvironment 1 1 1 1 1 1 2 QU Hong-bo , HAN Ming-li , FAN Yuan-ming , ZENG Ni , ZHU Zhi-kun , WU Cheng-yi , TANG Wei-xue 1. Department of End