杀虫剂离体（invitro）筛选方法研究进展.pptVIP

杀虫剂离体(in vitro)筛选方法研究进展  传统的农药筛选方法   MTT（溴化-[3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基]四氮唑）法是二十世纪八十年代发展起来的一种快速、简便的体外抗癌药物敏感性的测试方法。目前已被广泛用于杀虫剂离体筛选实验。其作用的基本原理如下：活细胞线粒体中的琥玻酸脱氢酶能够还原黄色的溴化MTT为蓝紫色的不溶于水的甲臜（formazan），甲臜的生成量在通常情况下与活细胞数成正比。由于甲臜的生成量可通过酶标仪测定其在570nm处的吸收度（OD值）而测定，因此可根据OD值推测出活细胞的比例，测定化合物的杀虫活性。 3. 同位素示踪技术在杀虫剂离体中的应用 受体—配体结合分析法是一种灵敏，快速，简便，经济的离体生物活性测定方法，研究发现，利用合适的放射性配体作探针，检测受体—配体结合方式及强度，可用于杀虫剂分子的快速筛选。 配体与受体作用在作用于GABAA受体的杀虫剂筛选中常用的探针有[3H]EBOB（1-(4’-乙炔基苯基)-4-正丙基-2,6,7-三氧杂双环[2.2.2]辛烷），[3H]Ivermectin B1a,，[35S]TBPB（4-叔丁基-双环硫化磷酸酯），作用于烟碱乙酰胆碱受体的[3H]IMI（1-（6-氯-3-吡啶甲基）-N-硝基-咪唑烷-2-亚胺），作用于鱼尼