芪参益气方对急性心肌梗死大鼠心肌蛋白质组的影响.pdfVIP

第３４卷第８期 Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ　８ ２００９年４月 　　　　　　 　 　 　 　 　　　　　　 　 　 　 　　Ａｐｒｉｌ，２００９ 芪参益气方对急性心肌梗死大鼠心肌 蛋白质组的影响  洪诚韬，王　毅 ，楼剑洲，刘　骞，瞿海斌，程翼宇 （浙江大学 中药科学与工程学系，浙江杭州３１００５８） ［摘要］　目的：应用蛋白质组学技术研究芪参益气方对急性心梗大鼠心肌蛋白质组表达的影响，在蛋白质水平上探讨芪 参益气方心肌保护的作用机制。方法：收集假手术、急性心肌梗死以及芪参益气方给药大鼠的心脏，使用双向电泳和基质辅 助激光解吸离子质谱，分析比较各组大鼠心肌蛋白质组表达的差异。结果：与心肌梗死模型组相比，芪参益气方给药组心肌 组织中有９个蛋白点的表达量显著上调，５个蛋白点的表达量显著下调。这些蛋白点的功能与能量代谢、氧化应激及细胞骨 架构成等相关。结论：芪参益气方能够部分回复心肌损伤过程中的能量供应，减少氧化应激，促进受损细胞恢复，从而达到其 心肌保护作用。 ［关键词］　心肌缺血；药物蛋白质组学；芪参益气方；中药复方；双向电泳 　　冠心病是目前致死率最高的疾病之一，其在我 芪参益气方，丹参购自天津天士力商洛药材基 ［１］ 国发病率已呈上升的趋势 。由黄芪、丹参、三七、 地，黄芪、三七和降香均购自杭州中药饮片厂，所有 降香组成的芪参益气方是一种有效治疗冠心病的中 药材经本院陈柳蓉副教授鉴定，符合２００５年版《中 ［６］ 药方剂。该方制成的芪参益气滴丸在临床上对气虚 国药典》一部中各药材的有关规定。参照专利 提 血瘀证候及血液流变学诸项指标具有明显的改善作 取方法以及临床用药，折算给药剂量，制成每毫升 ［２］ 用 。 含１０５６ｍｇ黄芪提取物、８４８ｍｇ丹参提取物、 蛋白质组学技术能够系统地反映蛋白质的表达 ０９３ｍｇ三七提取物以及１４７ Ｌ降香挥发油的水 μ 模式，近年来在心血管疾病病理及药理方面的研究 溶液。 ［３４］ 报道日益增多 。双向电泳和基质辅助激光解吸 １．３　试剂 离子质谱作为蛋白质组分析中应用最为广泛的分离 蛋白纯化试剂盒，蛋白定量试剂盒，ＩＰＧ胶条 和鉴定技术，已成熟地运用于心血管疾病研究中蛋 （非线性，２４ｃｍ，ｐＨ３～１０），ＩＰＧ缓冲液购自ＧＥ 白差异点的识别和归属［５］。本实验以急性心肌梗 Ｈｅａｌｔｈ公司。乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶同工酶 死大鼠心肌组织为研究对象，对芪参益气方作用下 （ＣＫＭＢ）测定试剂盒购自宁波亚太生物技术有限 心肌组织的蛋白质组进行分析比较，寻找和发现差 责任公司。 异蛋白，从蛋白质水平探讨芪参益气方抗心肌缺血 １．４　仪器 的作用机制。 ＧＥＨｅａｌｔｈ双向电泳仪，配有 ＥｔｔａｎＩＰＧｐｈｏｒ和 １　材料 ＥｔｔａｎＤＡＬＴｓｉｘ；ＵｍａｘＰｏｗｅｒＬｏｏｋ２１００ＸＬ扫描仪；Ｉｍ １．１　动物 ａｇｅＭａｓｔｅｒ２ＤＰｌａｔｉｎｕｍ图像分析软件；ＡＢＩ４７００型蛋 雄性ＳＤ大鼠１２只，体重２２０～２５０ｇ，购自浙江