Nrf3通路参与星形胶质细胞对抗鱼藤酮毒性的保护作用.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３０（１）：１９２４ Ｎｒｆ３通路参与星形胶质细胞对抗鱼藤 酮毒性的保护作用 １ ２ ２ ２ ２ ２ ２ 苏玉金 　曹　倩 　鲁玲玲 　孙晓红 　高　华 　赵莎莎 　杨　慧 （１首都医科大学北京市神经外科研究所　北京　１０００６９） （２首都医科大学北京神经科学研究所 北京神经再生修复研究重点实验室教育部神经变性病学重点实验室　北京　１０００６９） 摘要　目的：寻找星形胶质细胞在对抗由鱼藤酮导致的氧化应激中发挥保护作用的相关分子并探讨 其作用机制。方法：小鼠多巴胺能ＭＮ９Ｄ细胞分别在星形胶质细胞条件培养液（ＡＣＭ）与星形胶质细 胞用新鲜培养基中培养２４小时后加入鱼藤酮作用４８小时。细胞计数，评价星形胶质细胞条件培养 液对ＭＮ９Ｄ细胞的保护作用。利用基因芯片技术寻找ＭＮ９Ｄ细胞在ＡＣＭ处理后发生表达上调或下 调基因，并对这些基因进行分析，找出有意义基因。结果：在不同作用时间和鱼藤酮浓度梯度下，经 过ＡＣＭ处理的ＭＮ９Ｄ细胞活性显著高于在普通培养基中培养的细胞。初步得到１０４个差异表达基 因，其中６２个表达上调基因，４２个表达下调基因。这些基因主要与凋亡、肿瘤、细胞周期、代谢、信号 转导、转录调节、翻译调节和传递蛋白等相关。对其中的Ａｔｐ５ａ１，Ｎｒｆ３基因进行分析，发现Ｎｒｆ３通路 参与了ＡＣＭ的保护作用。结论：ＡＣＭ能保护ＭＮ９Ｄ细胞抵抗鱼藤酮所致的细胞毒性，Ａｔｐ５ａ１， Ｎｒｆ３，ＧＣＬ，ＮＱＯ１等基因经ＡＣＭ处理后发生差异表达，可能是星形胶质细胞保护作用的部分下游信 号通路。 关键词　帕金森病　星形胶质细胞　基因芯片 中图分类号　Ｑ７８９ 　　生物的大脑由神经元和胶质细胞两类细胞组成。传 ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄｍｅｄｉｕｍ，ＡＣＭ）可以保护神经母细胞瘤细胞抵 统的研究焦点大多集中在神经元，而认为胶质细胞只对 抗谷氨酸盐的毒性作用。 神经元起营养支持作用。但是，最近越来越多的研究表 　　此外，在研究帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）的 明星形胶质细胞不仅能够以多种方式与神经元发生相互 过程中，许多证据也支持星形胶质细胞在病变过程中起 作用，发挥着摄取、释放谷氨酸盐，实现 ＋ ＋ ［７］ Ｋ 和Ｈ 的缓冲， 保护作用。Ｌａｎｇｅｖｅｌｄ等 在ＡＣＭ的存在下，观察ＨＯ ２ ２ 水的转运等功能，并且在神经系统发育，突触传递，神经 对多巴胺能神经元的毒性作用，结果发现，纹状体和皮层 组织修复与再生，神经免疫以及多种神经疾病的病理机 星形胶质细胞可以保护中脑多巴胺能神经元抵抗ＨＯ ２ ２ ［１４］ 制等方面，都起着十分重要的作用 。更重要的是， 的毒性。此外，有研究表明中脑星形胶质细胞对于６羟 ［５］ Ｂｒｏｗｎ等 发现星形胶质细胞（ａｓｔｒｏｃｙｔｅ，ＡＳ）对谷氨酸盐 ［８］ ［９］ 多巴的毒性作用有一定的抵抗作用 。Ｓａｕｒａ等 的在 兴奋性毒性诱导的神经元凋亡有一定的抑制作用。而 体实验发现，星形胶质细胞局部活化可以减少６羟多巴 ［６］ Ａｍａｎｏ等 也发现星形胶质细胞的条件培养基（ａｓｔｒｏｃｙｔｅ