MMP-9-siRNA对乳腺癌细胞中MMP-9表达的影响.pdfVIP

解剖与临床 2011年8月第 16卷第4期 AnatomyandClinics，Aug．2011，Vo1．16No．4 275 MMP一9一siRNA对乳腺癌细胞 中MMP一9表达的影响 秦优优 杨学伟 闫朝岐 郭宝良 张建国 作者单位：150086 黑龙江哈尔滨 ，哈尔滨医科大学附属第二医院普外科 作者简介 ：秦优优 (1982一)，女 ，住院医师，医学硕士，研究方向：乳腺疾病 通信作者：杨学伟，E—mail：yangxwl1855@163．com 【摘要】 目的：探讨MMP-9小分子干扰RNA(MMP-9一siRNA)对乳腺癌MDA—MB-231细胞中MMP一 9表达的影响。方法：化学合成针对MMP-9的小分子干扰RNA(MMP-9一siRNA)，并将其转染到乳腺癌 MDA。MB-231细胞。本实验分为空白组(不转染任何siRNA)、对照组(转染 Control-siRNA50nmol／L)和 实验组(又分为3个亚组，分别转染10、50、100nmol／LMMP-9一siRNA)3组。应用RT—PCR法及Western blot法分别在 mRNA水平及蛋白水平检测并比较空白组、对照组和实验组 中MMP-9表达及其差异。结 果 ：RT—PCR结果显示，对照组 MMP-9mRNA表达率为99．2％±4．9％，与空白组比较差异无统计学意义 (P0．05)；实验组 l0、50、100nmol／LMMP-9-siRNA3个亚组 MDA-MB-231细胞MMP-9mRNA表达率 分别为80．3％-4-5．O％、65．2％ ±4．5％、55．9％-4-5．1％，与空白组比较差异有统计学意义 (P0．05)。 Westernblot结果显示 ，对照组蛋白表达率为 101．7％±3．1％，与空白组比较差异无统计学意义 (P0． 05)；实验组 10、50、100nmolfLMMP-9-siRNA3个亚组 MDA-MB-231细胞 MMP-9蛋白质表达率分别为 77．6％±3．9％、62．7％±4．1％、55．0％ ±4．8％，与空白组比较差异有统计学意义 (P0．05)。结论： 构建的MMP-9一siRNA能够抑制MDA—MB-231细胞中MMP-9的表达，为基因水平治疗乳腺癌提供实验 依据。 【关键词】 siRNA；MMP-9；乳腺癌 doi： 10．3969／j．issn．1671—7163．2011．04．005 【中图分类号】 R737．9 文【献标识码】A 【文章编号】 1671-7163(2011)04-0275-04 EffectsofMM P-9-siRNA onMM P-9Expression inMDA—M B-231Cells Qm You—you，YANGXue—wei，YANZhao—qi，GUOBao—liang，ZHANGJian—guo．DepartmentofGener- alSurgery，theSecondAffiliatedHospital，HarbinMedicalUniversity，Harbin150086，China 【Abstract】 Objective：ToinvestigatetheeffectsofsiRNAonMMP-9expressioninMDA—MB-231cells． Methods：siRNA oftargetingMMP-9wasdesignedandsynthesized，thentransfectedintoMDA-MB-231cells． Thisstudywasdividedintonon—siRNA group．controlgroupwhichtransfectd’vitIlControl—siRNAandexper- imental groupwhichtrna sfected tIlMMP-9-siRNA．Th eexperimental groupsweretransfectedwith10，50， 100nmol／LMMP-9一siRNA respectively．MMP-9mRNA expressionwasdeterminedbyRT—PCR andprotein expressionwasdetectedbyWestern—blotanalysis．Results：Th eresultsofRT—PCR showedthatMMP一9mR— NAexpressionrateofcontrolgroupwas99．2％