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特殊毒性及其试验 ★ 特殊毒性试验: ? 致突变试验 ? 致畸试验 ? 致癌试验 ? 繁殖试验（生殖试验） ? 行为试验 一、致突变试验 （一）细菌回复突变试验（Ames test） (1) 原理 试验菌种 野生型 突变型 鼠伤寒沙门氏菌 his+ his- 在缺乏his的培养基 能生长 不能生长 Ames试验原理： (2) 使用菌株 Ames 1975年推荐的沙门氏菌标准菌株为： TA98,TA100,TA1535,TA1537,TA1538; 1983年改推荐用: TA97, 检测移码; TA98, 检测碱基置换; TA100,检测碱基置换及移码; TA102,检测碱基置换及移码。 (3) 试验方法 致突变试验分体内体外两种情况： 体外试验：检测间接致突变物，需加S9(体外代谢活化系统 )，此法称微粒体间介法。 体内试验：可检测直接及间接致突变物， 不必加S9 此法称宿主间介法。 (4) 关于突变类型 分为:基因突变和染色体畸变 1. 基因突变(gene mutation) 或称 点突变(point mutation): 是指不能用光学显微镜直接观察到的遗传物质损伤 基因突变是遗传物质在分子水平上的改变。 包括： 碱基置换（base substitution） 移码（frame shift） 大段损伤（Large deletion or insertion ） ① 碱基置换： 某一碱基脱落或配对性能改变 DNA复制时碱基错配（mispairing) 第二次DNA复制时按正常配对 遗传下去 * 转换(transition)： A G C T * 颠换(transversion): A T G C 无论转换或是颠换都只涉及一对碱基,故称点突变。 * 后果：三联密码子的改变，可能出现同义密码， 错义密码或终止密码，从而使基因表达 改变。 ② 移码 是DNA中增加或减少一对或几对不等于3的倍数 的碱基改变所造成的突变。 这种突变可造成整个DNA或一个基因阅读框架的 改变。 后果：移码易造成致死性突变； ③ 大段损伤 是指DNA链的大段缺失或插入。 可能涉及数以千计的Nt（核苷酸） 。 * 小缺失（small deletion): 缺失的Nt 远远小于显微镜的观察能力。 * 插入（insertion): 一段游离Nt整合到另一染色体的某一位置。 * 转座子（trasposon): 在质粒（plasimd)与质粒之间和质粒与染色 体之间可能出现转移位置的小段DNA。 这种位置的转动称为转座（transposition) * 后果：a.gene突变； b.产生新的gene c.染色体畸变；d.生物进化。 2. 染色体畸变 ① 结构畸变 * 裂隙和断裂(gap and break): 仍保持线状连接者为裂隙,无线状连接者为断裂 * 无着丝粒断片和缺失(acentric fragment and deletion) 微核(micronucleus): 无着丝粒断片。 微小体（minute body): 小于染色体宽度的无着丝粒断 片,常成双出现。 * 环状染色体(ring chromosome) * 倒位(inversion): 断片倒
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