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急性肺损伤时水通道变化的研究 摘要 各种凌症细胞(巨噬细胞、嗜中性粒细胞和淋巴细胞)介导的肺局部炎症 失控所致的肺毛细血管膜损伤。肺泡毛细血管膜(呼吸膜)的破坏导致其通 透性增高，进而肺水增加及液体潴留，影响肺功能。 肺组织是如何完成液体转运的?长期以来的理论认为水的转运是通过 · 个飞跃。通过参考国外文献报道，我们选择与肺组织可能有关的AQPl及 过内毒素诱导的急性肺损伤大鼠动物模型，探究肺泡毛细血管膜AQPl、 活性物质系统有否相关关系。从而为急性肺损伤的发病机理研究提供理论 及实验依据。 一．内毒素致大鼠急性肺损伤动物模型的建立二 目的：急性肺损伤发病率及死亡率均较高，发病机理迄今尚不清楚， 也无有效的治疗方法。本实验试图建立一种较轻型的急性肺损伤动物模型， 为研究该病的早期发病机理及治疗提供重要的观察手段。f方法：将45只 SD大鼠麻醉后仰卧固定于操作台上，正中切开颈前皮肤，分离皮下组织， 暴露气管，以静脉套管代替气管导管，给予实验组大鼠气管内灌注内毒索 (LPs)O．5ml／kg(用生理盐水配制LPS 生理仪测血压，称量肺湿重及干重，测干湿重(W／D)比；并测量支气管肺 泡灌洗液(BALF)中自蛋臼，离心沉淀部分涂片腿染色，计数细胞总分数。 结果：实验动物均于观察时间内存活。光镜及电镜病理改变以4卜12h为最 严重，出现肺组织肿胀、被膜下灶状出血点，肺泡腔内多形核中性粒细胞 (P心)及红细胞浸润，间质水肿及肺不张等。肺泡I型上皮细胞胞膜膨出、 、突起。肺泡II型上皮细胞微绒毛减少、脱落，胞质空泡变性，板层小体排 空。毛细血管内皮细胞肿胀。BALF中白蛋白于各实验组高于对照组(o．15 ±0．03G／L)，以4h—12h(0．54±0．16 明显。细胞计数以各实验组多形核中性粒细胞明显增高为特征。平均动脉 急性肺损伤动物模型，该模型以4h一12h为损伤严重时相，24h以后有不 同程度的恢复。 关键词：急性肺损伤：腊多糖?sD大鼠。 二．内毒素致急性肺损伤大鼠AQPl、AQP5变化的研究 细胞膜水通透力的功能。本实验首先研究水通道l、水通道5在肺组织中 有无表达及具体位置，进而探究急性肺损伤时水通道1、水通道5表达的 部位及数量有否改变及糖皮质激素干预对它们有否影响。(方法：将72只 sD大鼠随机分为盐水(NS)对照组、急性肺损伤组及糖皮质激素干预组。 糖皮质激素干预组为气管内灌注LPs同时，尾静脉推注甲基强的松龙 (30m∥kg)。采用免疫组织化学技术及免疫电镜方法检测各组大鼠水通道 (碱性磷酸酶标记的二抗，l：2000)。结果：水通道l主要表达于肺泡及支 气管周围的毛细血管内皮细胞腔膜面及基侧膜面、气管腔上皮的顶膜面、 细支气管粘膜下腺、脏层胸膜；水通道5主要表达于肺泡I型上皮细胞的 顶膜面。急性肺损伤时水通道1、水通道5表达的细胞类型保持不变，肺 损伤4h一12h水通道l在毛细血管内皮细胞的表达(20．8±3．4 A，21．4± 3．6A)明显低于NS对照组(33．5±5．3 在毛细血管内皮细胞的表达较4h一12h有所恢复，但仍然低于NS对照组 ±4．7A，26．8±4．8 A， I型上皮细胞的表达于急性肺损伤各时相均明显低于对照组(24．6±3．6 均Po．05)，激素干预对水通道5表达减少无影响卉结论：水通道1、水通 道5在肺组织中有丰富的表达；急性肺损伤出现肺水肿时水通道1、水通 道5表达均减少，推测呼吸膜水通道1、水通道5的表达下降可能与肺水 肿的形成有关；皮质激素干预能上调水通道l的表达，但对水通道5的表 达无影响。 √ j／ 、， 关键词：急性肺损伤，水通道1，水通道5：糖皮质激素。’ 目的：肺表面活性物质相关蛋白A(sP—A)是肺表面活性物质中与脂类 特异结合的蛋白质主要成分之一，近年来它在急性肺损伤的发生、发展中 的作用受