水稻稻瘟病菌（Pyricularia+grisea）农用抗生素A11研究.pdf

摘要 从土壤中分离的诺卡氏菌All其代谢产物对稻瘟病有较好的抑制作用，具有进一 步的研究价值。本研究通过对诺卡氏菌株All的诱变改良，紫外线(uV)、硫酸二乙 ● 酯(DES)、微波(Mv)三种诱变处理均提高了对稻瘟病菌的抑制效果。其中经过 u矿诱变的出现了一个正突变最高的菌Wu-5．7，抑菌效果显著高于出发抹，提高率达 ，IIII_， 定性试验：连续传代8代，证明突变株遗传性状稳定。 对高产菌株进行了摇瓶发酵培养基筛选和最佳发酵条件的研究。对培养基配方进 行单因子试验，筛选出最佳的碳源和氮源；对培养基各组分进行了正交试验，找到最 佳配比：还对温度、无机盐、摇瓶装量、转速等发酵工艺条件进行了探索。得出最佳 I 通过对拮抗稻瘟病的农抗A11分离纯化的探索研究，初步确定其代谢产物的分 一 离纯化的程序：发酵液通过离心，菌丝体用等体积丙酮浸泡过夜与发酵上清夜合并， 加入5％的ZnS04沉淀无活性蛋白质；萃取活性成分的试剂确定为氯仿：乙酸乙酯 农抗All粗制品进行薄层层析确定为乙酸乙酯：甲醇=l：l试剂组合，共分离出6个 条带，发现Rf值为O．74的条带样品对稻瘟病菌有抑菌效果；大量制备Rf值为0．74 的条带样品，少量丙酮洗脱，离心后除去硅胶，浓缩得农抗All精制品。高效液相 色谱分析得到4个组分。 将农抗All精制品作为原药进行微乳剂剂型的研究，对农抗All的乳化剂进行筛 1 选，考察了水质、乳化剂、溶剂等对微乳剂稳定性的影响，得到最佳配方：农抗A1 通过对农抗I．All微乳剂生物活性测定，发现农抗All微乳剂稀释200倍液对稻瘟病 I _．， 菌菌丝生长和孢子萌发具有显著的抑制作用，分别达63．56％和60．80％；通过农抗All ‘专 ● 微乳剂大田试验，农抗All微乳剂稀释200倍液对稻瘟病叶瘟的保护和治疗效果分别 比较好，最高增产效果达23％。 关键词：稻瘟病；农用抗生素：诱变；分离纯化：薄层层析；微乳剂。 I onthe All Study agro-antibioticsagainst 砖riculariagrisea Ye Yajun(PlantPathology，SichuanAgricultural University) ÷ ‘ DirectedProfessor Min by Zhang ●●●●●●●l Abstract