螺旋藻转基因受体系统研究.pdf

399971 y 青岛海洋大学博士论文 螺旋藻转基因受体系统相关研究 螺旋藻转基因受体系统相关研究 内容提要 本文对以电转化法转化螺旋藻的受体系统进行了研究，其中包括： 发现了一种新的、快速筛选无菌螺旋藻品系的方法；应用离子法获得 了再生率为28．6％的单细胞：通过螺旋藻对基因工程中常用的6种抗 生素的敏感性研究，证实螺旋藻对氯霉素最敏感，氯霉素是比较理想 的转基因螺旋藻抗性选择试剂；比较分析了2个螺旋藻物种7个品系 胞外和胞内核酸酶活性，确定用液体培养基清洗可消除胞外核酸酶活 活性；探索了电转化法转化钝顶螺旋藻OUQDS6_4的最佳转化条件， 即对数中期的螺旋藻用于转化为宜。㈢脉冲时间是5．0ms时，藻丝受 体和单细胞／藻丝段受体的半致死电场强度分别是3．75—5．0kV／cm和 到钝顶螺旋藻OUQDS6．。细胞内，利用ece,检测和点杂交技术均证明 质粒pB