黄芩茎叶总黄酮对大鼠心肌细胞氧化损伤保护作用及其机制研究.pdfVIP

中文摘要 黄芩茎叶总黄酮对大一心肌细胞氯化损伤 的保护作用及其机制的研究 中文摘要 目的：现已有大量的动物实验和临床研究证明，在 心肌缺血／再灌注损伤中，产生大量的氧自山基，可引起 严重的心律失常、心肌顿抑及最严重的不n]．逆的心肌细 胞凋r：和坏死。由于认识到氧化应激是导致心肌缺吼／再 灌注损伤的重要病理生理机制之一，抗氧化已成为近年 研究心肌缺血／再灌注损伤治疗的热点。因此，小研究利 用外源性活性氧(H，O，、O一，)诱导的心肌细胞氧化损fjj 模型，从细胞水平上，观察r黄芩茎u-}总黄幽(SSTF) 对心肌细胞的保护作用，并初步探讨了黄芩筝叶总黄酮 抗心肌细胞氧化损伤的机制，为预防治疗缺向。陀心脏痫 的新药开发提供确切的实验与理论依据。 ，方法： 1．建立H：O：、0-2诱导的心肌细胞氧化损伤模型： 采用胰酶消化法分离培养Wistar大鼠乳鼠心肌细 胞，随机分为正常对照组、不同浓度的H，O，(0．1～ 1mmol／L)处理组，处理4小时：黄嘌呤(X)／黄嘌呤氧 处理2小时。然后，检测心肌细胞培养液。fI乳酸脱氯酶 (LDH)活性，心肌细胞MTT代谢率及细胞存活率。 2．黄芩茎叶总黄胃对H：o：、o‘：诱导的心肌细胞氧化损 中文摘要 伤的保护作用 将分离纯化的一c、肌细胞随机分为①正常对照组：② H，O，损伤组(H，O，终浓度0．5mmol／L)③x／xo损伤组 lmmol／L， (60mg／L：90mg／L；120mg／L)+X／XO终浓艘(X XO 0．1U／m1)]。(1)检测心肌细胞培养液LDH释放最、 心肌细胞MTT代谢率和损伤抑制率：(2)榆测心肌细胞 内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量： (3)琥珀酸脱氢酶(SDH)化学染色及透射【【i镜F进行 细胞形态学观察。 结果： 1、H：O：、0-2诱导心肌细胞氧化损伤模型 1 1 H，O，氧化损伤模型心肌细胞培养液r}l力u入H，O，作 j}j4小时后，细胞受到损伤，与正常对照纰相比，H，O． 仡0．1～lmmol／L的范围内，心肌细胞释放LDH含砭El逐 渐增加(p0．01)。MTT代谢率及细胞存活率逐渐降低(P 0．01)。进一步实验证明在H，O，浓度为0．1～ 0．7mmol／L范围内，细胞LDH的释放量与H，0，浓度自 r=0．997。在H，o， 良好的线性关系。y=310．8+1072．6x 浓度为0．1～lmmol／L范围内，细胞存活率与H，0，浓艘 r=0．996 仃良好的线性关系。y=0．988—0．573x 1 2 J冉．，卜 O，氧化损伤模型心肌细胞培养液加入X／XO 0，作用2小时后，细胞受到损伤，与正常埘照组相比， !茎塑些 ～一一 一一 内，心肌细胞释放LDH含量逐渐增加(P0．01)，MTT 代谢率及细胞存活率逐渐降低(P0．01)。进+步实验证： U／m1)范 mmol／L)／xo(0．02～O．14 明在X(0．2～1．4 围内，细胞LDH的释放量与x／xo浓度有良好的线竹： r=O．995。在X(0．2～ 关系，y=353．17+411．9x 与X／XO浓度有良好的线性关系。y=0．995—0．288x r=O．996。 与正常对照组比较，H，O，和X／XO处理纰LDH释 放量增加，表明外源性H：O。O：对心肌细胞膜具行损 伤作刚。而YTT代谢率及细胞存活率降低提，Jj外源7陀 H，o，、O．，对心肌细胞生长有抑制作用。