酿酒葡萄皮渣中反式白藜芦醇提取纯化及其抗氧化性研究.pdfVIP

摘要 于葡要 本试验以工业上生产葡萄酒的副产物——葡萄皮渣为原料，探索从其中回收反式白藜芦醇的 工艺，对反式白藜芦醇的提取及纯化方法进行摸索，并对其抗氧化性进行研究，为葡萄皮渣的开 发利用提供科学依据。 首先确立了反式白藜芦醇的检测方法。用高效液相色谱法检测反式白藜芦醇含量，比较合适 的色谱条件是用甲醇．水(45：55，v／v)作流动相，流速为0．8mL／min，柱温为室温，在此条件下， 峰形好，分辨率高，反式白藜芦醇含量在Igg／mL～2099／mL的范围内呈良好的线性关系，其最 低检测限为199／mL；用荧光法检测反式白藜芦醇含量，较合适的条件是选择激发波长为336nm， 线性关系；通过紫外分光光度法检测反式白藜芦醇，首先确定反式白藜芦醇的最大吸收波长为 306rim，吸光度与浓度在O～899／mL的范围内具有良好的线性关系。 反式白藜芦醇的溶解性试验结果表明，在20℃～604C之间，丙酮对反式白藜芦醇溶解性最好。 反式白藜芦醇的稳定性试验结果表明，在通过紫外灯和太阳光直接照射15min后，反式白藜芦醇 紫外图谱发生变化，反式白藜芦醇受到严重破坏；即使在避光的情况下，24h内反式白藜芦醇含 量仍呈逐渐下降趋势；但总体而言，避光条件下比在太阳直射条件下损失的反式白藜芦醇量要少。 故在反式白藜芦醇提取纯化过程中严格避免直射太阳光，而且原料采用阴干等方法是非常必要 的，否则将损失较多的反式白藜芦醇。 对酿酒葡萄皮渣中反式白藜芦醇的提取分别采用乙醇回流提取法和超声波提取法。乙醇回流 提取法提取其中反式白藜芦醇的较佳提取条件为：用浓度为80％的乙醇溶液在60。C提取5h，固液 比为1：20(g／mL)，葡萄皮渣中反式白藜芦醇的提取得率为94299／g采用超声波法提取反式白藜 芦醇的较佳提取条件为：浓度为80％的乙醇溶液于室温按固液比为1：15，超声功率为350W的条 件下超声处理50min，葡萄皮渣中反式白藜芦醇的提取得率为133．299／g。通过两种提取方法的比 较，可以得出超声波提取法优于乙醇回流提取法的结论。采用超声波提取不仅提高了反式白藜芦 醇的提取得率，减少了溶剂用量，而且缩短了提取时间。 采用超滤．沉淀结合法对反式白藜芦醇的纯化工艺进行了探究，确定了超滤．沉淀结合法纯化 反式白藜芦醇的较优条件。超滤条件为选择切割分子量为10000的膜，超滤压力为48～62kPa， 超滤温度为室温：沉淀条件为用pH为10的NaOH水溶液萃取反式白藜芦醇，其酚钠溶液经超滤 后，最终通过调pH值为3，使反式白藜芦醇沉淀出来。超滤．沉淀结合法能有效地纯化反式白藜 芦醇，反式白藜芦醇的最终纯度为74．1％。 测定了鲜食葡萄的叶片与叶柄中反式白藜芦醇的含量，可以得出鲜食葡萄的叶片与叶柄中反 式白藜芦醇的含量因品种不同差异较大的结论，这也为从废弃葡萄叶片及叶柄中提取反式白藜芦 醇提供了科学依据。 分别采用Ⅱ-脱氧核糖氧化法和连苯三酚自氧化法，进行了反式白藜芦醇清除羟自由基-OH和 超氧自由基Oz--的抗氧化试验。结果表明，反式白藜芦醇对自由基有较强的清除能力，但这种能 力依赖于反式自藜芦醇溶液的浓度。 关键词 反式白藜芦醇； 酿酒葡萄皮渣； 抗氧化性 Studieson Extraction， PurificationAndAntioxidantof in Activity Wine BrewingGrape Dregs AB STRACT Inthis isaimed at and skinandresidues which experiment，itchieflydevelopingutilizing ofgrape WaSwine inindustrial the of