侵染美国薄荷的小西葫芦黄花叶病毒的检测与鉴定.pdfVIP

云南农业大学学报　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１３，２８（６）：８９８－９０１ ｈｔｔｐ：／／ｘｂｙｎａｕｅｄｕｃｎ ＩＳＳＮ１００４－３９０Ｘ；ＣＯＤＥＮＹＮＤＸＡＸ Ｅｍａｉｌ：ｘｂ＠ｙｎａｕｅｄｕｃｎ ：１０３９６９／ｊｉｓｓｎ１００４－３９０Ｘ（ｎ）２０１３０６０２４ ＤＯＩ 侵染美国薄荷的小西葫芦黄花叶病毒的检测与鉴定 １ １ ２ １ ２ ２ 赵明富 ，彭　晟 ，杨　莹 ，孙　媛 ，陈　微 ，陈　兴 ［１．云南农业大学，农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，云南 昆明６５０２０１； ２．红云红河烟草 （集团）有限责任公司，云南 昆明６５０２０２］ 摘要：为明确侵染美国薄荷，引起花叶、叶片扭曲畸形等症状的病毒病原，对采集于云南石林烟庄的美国薄 荷采用电子显微镜观察和ＲＴＰＣＲ技术检测。在电子显微镜下观察到大小约７６０ｎｍ线状病毒粒子。提取总 ＲＮＡ，利用马铃薯Ｙ病毒科特异性简并引物 （Ｓｐｒｉｍｅｒ／Ｍ４）进行ＲＴＰＣＲ扩增，获得约１７００ｂｐ片段。经测序 和序列分析，结果表明：该片段含有１６８０个核苷酸，包含部分 ＮＩｂ基因 （６２１ｂｐ）、完整 ＣＰ基因 （８３７ｂｐ） 和３′ＵＴＲ区 （２１０ｂｐ）。序列同源性分析的结果显示与小西葫芦黄花叶病毒 （Ｚｕｃｃｈｉｎｉｙｅｌｌｏｗｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ， ＺＹＭＶ）分离物 （ＡＦ１２７９２９）的ＣＰ氨基酸序列同源性高达９８％，与ＺＹＭＶ分离物 （Ｌ３１３５０）ＣＰ氨基酸序列 同源性高达 ９３５％，表明侵染美国薄荷，引起花叶、叶片扭曲畸形的病毒病原为小西葫芦黄花叶病毒 （ＺＹＭＶ）。 关键词：美国薄荷；小西葫芦黄花叶病毒；ＲＴＰＣＲ 中图分类号：Ｓ４３５６７２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００４－３９０Ｘ（２０１３）０６－０８９８－０４ ＤｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＺｕｃｃｈｉｎｉｙｅｌｌｏｗｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｎｇＭｏｎａｒｄａｄｉｄｙｍａＬ． １ １ ２ １ ２ ２ ＺＨＡＯＭｉｎｇｆｕ，ＰＥＮＧＳｈｅｎｇ，ＹＡＮＧＹｉｎｇ，ＳＵＮＹｕａｎ，ＣＨＥＮＷｅｉ，ＣＨＥＮＸｉｎｇ ［１ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＡｇｒｏｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄＰｅｓｔＭａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＣｈｉｎａ，ＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２０１，Ｃｈｉｎａ；２ＨｏｎｇｙｕｎＨｏｎｇｈｅＴａｂａｃｃｏ（Ｇｒｏｕｐ）Ｃｏ，Ｌｔｄ，Ｋｕｎｍｉｎｇ６５０２０２，Ｃｈｉｎａ］ Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏａｓｃｅｒｔａｉｎｔｈｅｖｉｒａｌｐａｔｈｏｇｅｎｏｆｉｎｆｅｃｔｉｎｇＭｏｎａｒｄａｄｉｄｙｍａＬｗｈｉｃｈｓｈｏｗｉｎｇｔｈｅ ｓｙｍｐｔｏｍｏｆｍｏｓａｉｃ，ｌｅａｆｃｕｒｌｉｎｇ，ａｎｄｄｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ，ｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｄｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＴｏｂａｃｃｏｆｉｎｃａｏｆＳｔｏｎｅ ｆｏｒｅｓｔｉｎＹｕｎｎａｎｐｒｏｖｉｎｃｅｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄｗｉｔｈＴＥＭａｎｄＲＴＰＣＲＦｉｌａｍｅｎｔｏｕｓｐａｒｔｉｃｌｅｓ ｗｉｔｈｔｈｅｌｅｎｇｔｈｏｆ７６０ｎｍｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｕｎｄｅｒＴＥＭｆｒｏｍｄｉｓｅａｓｅｄＭｄｉｄｙｍａＬｓａｍｐｌｅｓＴｈｅｎＺｕｃ ｃｈｉｎｉｙｅｌｌｏｗｍｏｓａｉｃｖｉｒｕｓ（ＺＹＭＶ）ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｉｎｔｈｅｄｉｓｅａｓｅｄｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＭｄｉｄｙｍａＬ．ｂｙＲＴ－ ＰＣＲｗｉｔｈｇｅｎｅｒａｓｐｅｃｉｆｉｃｄｅｇｅｎｅｒａｔｅｐｒｉｍｅｒｓｏｆＰｏｔｙｖｉｒ