半胱天冬酶8在肾癌中的表达及其临床意义.pdf

中文摘要 半胱天冬酶．8在肾癌中的表达及其临床意义 摘 要 目的：半胱天冬酶．8是否能在肾癌中表达并存在表达水 平的改变。半胱天冬酶．8表达水平是否与肾癌的类型、病理 分期、组织学分级及转移相关联。采用缺口末端标记法研究 肾癌患者肾细胞凋亡情况并与Caspase．8表达作相关分析。通 过从细胞凋亡的角度了解肾癌的发生、发展、转移的途径， 有助于判断肾癌的预后，有可能为肾癌的基因治疗找到新的 靶点。 方法： 研究对象分为：研究组、对照组。 研究组：肾癌患者，40例。癌旁组织，40例。 对照组：正常肾组织，共lO例。 1缺口末端标记法检测细胞凋亡 采用缺口末端标记法(TUNEL)原位标记凋亡细胞核，以 PBS为阴性对照，按该试剂盒说明操作(武汉博士德生物工程 个视野计数至少200个细胞核，凋亡阳性细胞核呈棕黄色、 非凋亡细胞核呈蓝色)。根据公式(凋亡阳性细胞数／总细胞计 数X index，AI)，取其均值。 100％)计算细胞凋亡指数(apoptotic 2免疫组化sp法检测Caspase．8表达 物技术公司)，工作浓度1：100，sp免疫组化试剂盒(福建迈 新生物技术公司)，sp免疫组化染色按说明书进行，O．1mol／L， 中文摘要 枸橼酸盐缓冲液热修复抗原(98℃、5min)。 PBS替代． 结果判定：Caspase．8阳性判定：以0．1mol／L 抗体作为空白对照，用己知胃癌Caspase．8阳性表达片作为阳 性对照，肾癌细胞浆或细胞核中出现棕黄色颗粒者为 数5个视野，阳性细胞率=阳性细胞数／总细胞数X100％，表 达，5％为阴性表达。 Caspase．8表达量：所有免疫组化切片于实验结束时由操 作人员在单盲情况下于显微镜下观察，以SECOM摄像头将 病理切片上的肾癌图像采集入计算机，PIPS．2020超清晰彩色 病理图文系统行Caspase．8表达定量分析。计算公式如下： PU=100x(Ga-GA)／【(1一AAa)xGm觚] 为阳性反应组织面积，m为背景面积，GA为平均灰度级，Ga 为阳性反应组织灰度级。 结果： 1临床资料 40例研究对象，其中男性27例，女性13例，平均年龄53 岁。透明细胞癌13例，乳头状细胞癌12例，混合癌8例，其 他肾细胞癌(肾癌)7例。17例无癌转移，22例有癌转移。病理 分期I期1 级为高分化13例，中分化17例，低分化10例。 正常肾对照组10例，其中男性7例，女性3例，平均年龄 50岁。 中文摘要 病例组与对照组以及各亚组年龄、性别无明显统计学差 异(pO．05)。 2肾癌组织细胞凋亡情况研究 采用缺口末端标记法检测细胞凋亡，计算凋亡指数 提示肾癌组织存在细胞凋亡异常。 3肾组织细胞caspase．8表达研究 组织、癌旁组织、正常肾组织细胞质或细胞核内有棕黄色颗 粒，呈弥漫分布，呈Caspase．8阳性表达，提示正常细胞与癌 组织细胞均能表达caspase．8。 表达的阳性率无统计学意义(P0．05)。 两两之间的秩和检验，caspase．8的表达强度正常肾组织最高， 癌旁组织次之，癌组织最低(PO．01)。 中文摘要 织最高，癌旁组织次之，癌组织最低，经F检验，F=81．65， 提示肾癌组织存在Caspase．8表达改变。 4不同肾癌类型、病理分期、组织学分级及转移情况caspase．8 表达研究 透明细胞癌，乳头状细胞癌(嗜色细胞，颗粒细胞癌)， 混合癌，其他肾细胞癌，四个类型caspase．8表达强度的比较 Z=o．44， 明显关联。 等级相关分析得出相关系数F．0．60，有高度统计学意义 肾癌的组织学分级与caspase．8表达强度经统计学