瘦素促进FGR仔鼠肺发育及机制的实验研究.pdfVIP

国’主也焘量 瘦素促进FGR仔鼢发育及机制的实蜘究 瘦素促进FGR仔鼠肺发育及机制的实验研究 专 业：妇产科 博士研究生：陈慧 导 师：杨冬梓教授 中山大学附属第二医院，广东广州510120 摘 要 胎儿生长受限(Fetalgrowthrestriction，FGR)，又称胎儿宫内发育迟缓，指 孕37周后，胎儿出生体重小于25009，或低于同孕龄平均体重的两个标准差， 或低于同孕龄正常体重的第十百分位数。 导致其发生的原因较多，如遗传因素、胎儿畸形、宫内感染、胎儿生长相关 因子或激素分泌异常以及胎儿宫内营养不良等。 近年研究表明：FGR围生儿存在诸多急慢性肺部疾患的高发病率，如呼吸 distress 窘迫综合征(respiratorysyndrome，RDS)、新生儿窒息、支气管肺发育不 良(Bmnchopulrnonarydysplasia,BPD)等，上述疾病的发生主要与肺脏器官发 育受限、表面活性物质合成分泌不足有关。 此外，FGR儿一些成年期疾病的发生率也明显升高，如研究较多的冠心病、 慢性高血压及2型糖尿病。最近发现，成年期肺部疾患的发生与FGR也存在相 关性。FGR导致成年人疾病的主要机制，目前以“胎儿起源’(fetalorigins)假说为 主。即认为富内营养不良诱使胎儿发生生理功能方面的改变，以适应有限的营养 供给。久而久之，这些适应性变化造成机体结构的不可逆改变，构成成年疾病潜 在的发生基础。 近期研究发现，瘦素(Leptin，LEP)与胎儿生长发育密切相关。首先是对 于胎儿血循环中LEP的研究，Alnon等发现脐血LEP水平是巨大儿的一个独立 危险因素，对于预测巨大儿的发生有着重要的临床意义。而FGR儿的LEP浓度 ‘a》烹．悬焘量 瘦素促进FGR仔鼠肺发育及机制的实验研究 mRNA及其蛋白的表达，认为 明显低于正常儿。其次发现，胎盘组织存在LEP 胎盘是脐血LEP来源之一，对胎儿宫内生长发育有促进作用。在此基础上进一 步研究证实，LEP及其受体(Leptinreceptor,LEP．R)表达于多种动物的胎肺组 织，参与肺表面活性物质的合成和胎肺发育过程。FGR胎儿的急慢性呼吸系统 疾病的发生可能与其体内LEP、LEP．R产生、分泌或功能等的异常有关，对LEP 及其受体与胎肺发育关系，尤其是与FGR胎肺发育的关系，有待迸一步研究。 【研究目的】 l、建立FGR合并肺发育不良实验动物模型，为研究LEP与FGR胎肺发育 的关系，提供合适的工具。 2、探究FGR过程中，肺发育受限出现的时间点。为治疗时机的选择提供理 论依据。 3、比较FGR仔鼠与正常对照组仔鼠肺功能学、形态学指标，了解肺发育不 良对肺功能的近期影响。 4、检测LEP及其受体在仔鼠胎肺组织中的定位，了解其发挥调控肺发育作 用的解剖学基础。 5、研究LEP、LEP．R在肺发育各个阶段的表达，以及FGR组、对照组之间 表达的差异，分析其与仔鼠肺发育各项指标(肺重、呼吸评分、组织学评分、肺 泡腔面积比、肺间隔面积比)的相关性。 6、对比LEP干预后对仔鼠肺发育各项指标的影响，评价外源性使用LEP 调控肺发育的效果。 7、探讨LEP调节FGE仔鼠肺发育的机制。根据FGR动物模型发病机理， 体外模拟缺氧状态，建立细胞AECII细胞凋亡模型。通过检测LEP对缺氧诱导 IIcells，AEC 的肺泡lI型上皮细胞(Alveolar II)凋亡的作用以及LEP对 type FGR动物模型进行孕期干预后，肺组织凋亡关键酶、肺表面活性物质的变化， 分析LEP调控肺发育的作用环节。 【材料和方法】 1、FGR实验动物模型的建立i本研究采用子宫动静脉缩窄法。选取