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离子束辐照诱变细菌纤维素生产菌株研究 摘 要 本实验利用离子束辐照技术处理细菌纤维素（bacterial cellulose, BC）生产菌株-醋酸杆菌QAX993，筛选出了9株细菌纤维素产量高且具有抗拉、耐温、高吸水性等优良特性的醋酸杆菌。所筛选9突变菌株中，相对于出发菌株，产量提高最明显的是5D,提高了334.9%；持水率提高的有3D、5E，提高了分别为12.2%、10.6%；复水率提高的有5D、5G，提高百分比分别为1.55%、0.71%。 本研究有效提高细菌纤维素产量，降低生产成本，扩大细菌纤维素应用范围，促进细菌纤维素在我国的规模化生产和应用。 关键词：细菌纤维素，离子束辐照，诱变 Study on Mutagenesis of Strain Producing Bacterial Cellulose Using Ion Beam Irradiation ABSTRACT In this study, Acetobacter xylinum QAX993 were implanted with nitrogen ion beams. 9 strains which with high yield, high tensile strength and high water absorption were selected. Compared to the original strain, 5D’s production increased by 334.9%, 3D and 5E’s water absorptions increased by 12.2% and10.6%. 5D and 5G’s recovery rates of water increased by 1.55% and 0.71%. This study effectively improves the production of bacterial cellulose, it reduces the cost and expands the scope of the application of bacterial cellulose. It’s also beneficial to promoting large-scale production and application of bacterial cellulose in our country. KEY WORDS: bacterial cellulose，ion beam irradiation，mutagenesis 目 录 摘 要 I ABSTRACT Ⅱ 1 综 述 1 1.1 研究背景 1 1.1.1 细菌纤维素特性 1 1.1.2 细菌纤维素的生物合成 2 1.1.3 细菌纤维素应用现状 3 1.1.4 离子束辐照诱变 3 1.2 研究现状 4 1.3 项目实施的目的、意义 5 1.4 研究内容 5 1.4.1离子束辐照诱变条件的确定 5 1.4.2 固体培养基平板-96孔板-试管筛选体系的建立 5 1.4.3 突变菌株的诱变 6 1.4.4 突变菌株的筛选 6 1.4.5突变菌株遗传稳定性研究 6 1.4.6突变菌株产物材料学特性研究 6 2 实 验 7 2.1 实验材料与仪器 7 2.1.1 菌种 7 2.1.2实验仪器 7 2.1.2实验试剂 7 2.1.3 培养基 7 2.2 实验方法 8 2.2.1 细菌纤维素膜的处理 8 2.2.2 细菌纤维素膜的干燥 8 2.2.3 细菌纤维素膜产量的测定 8 2.2.4 细菌纤维素膜的持水率、复水率测定 8 2.2.5 菌体细胞的收集及菌体浓度确定 8 2.2.6 离子束辐照诱变 9 2.2.7突变菌株电镜扫描 9 2.3 实验内容 9 2.3.1 离子束辐照诱变条件的确定 9 2.3.2 固体培养基平板-96孔板-试管筛选体系的建立 10 2.3.3 木醋杆菌QAX993菌株的N+离子束辐照诱变 10 2.3.4 突变菌株的筛选 10 2.3.5 突变菌株的遗传稳定性研究 11 3 结果与讨论 12 3.1 稀释浓度的确定 12 3.2 诱变条件的确定 12 3.3 木醋杆菌QAX993菌株的N+离子束辐照诱变及初筛 13 3.4 木醋杆菌QAX993菌株的复筛 14 3.5 变异菌株BC膜电镜扫描 20 3.6 木醋杆菌QAX993菌株的遗传稳定性研究 21 4 结 论 24 5 收获及感想 25 致 谢 26 参考文献 27 1 综 述 1.1 研究背景 细菌纤维素（Bacterial Cellulose, BC）是由葡萄糖以β-1,4-糖苷键聚合