miR216b通过靶向调控蛋白激酶Cα基因的表达抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭.pdfVIP

虫堡胜擅苤盍垫!!至!旦箍箜鲞筮!翅堡!也』Q!!!!：!!P!!些笪!!!!：!!!：箜：盟!：! ·645· ．基础研究 miR．216b通过靶向调控蛋白激酶CoL基因的 表达抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭 邓敏刘季芳谷依学 郑国沛 贺智敏 【摘要】 目的明确miR-216b是否通过靶向调控蛋白激酶Cot(PKc仅)基因的表达来抑制鼻咽 癌细胞的增殖和侵袭。方法构建PKCOt3’非编码区(UTR)一荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告 系统检测miR-216b对PKCOt3’UTR-荧光素酶活性的影响。将miR-216b模拟物转染鼻咽癌细胞 CNE2，采用实时荧光定量PCR和Westernblot法检测PKCOtmRNA和蛋白的表达水平。将PKCOt siRNA转染CNE2细胞，通过MTS细胞增殖实验和Transwell侵袭实验观察PKCOt基因表达下调对 CNE2细胞增殖和侵袭的影响。将PKCOt重组质粒与miR-216b模拟物共转染CNE2细胞，通过MTS 细胞增殖实验检测CNE2细胞的增殖能力。结果双荧光素酶报告检测结果显示，miR-216b能特异 性地与PKCOtmRNA的3’UTR结合，下调荧光素酶活性，其活性约为转染对照模拟物细胞的62．4％。 过表达miR-216b的CNE2细胞中PKCOtmRNA和蛋白的表达水平均降低，与对照细胞比较，分别降低 49．1％和55．7％。siRNA干扰PKCOt表达能抑制CNE2细胞的增殖和侵袭能力，能部分模拟miR-216b 的抑瘤功能。过表达PKCOt能部分逆转miR-216b对CNE2细胞的增殖抑制作用。结论miR一216b通 过靶向调控PKCa基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭。 【主题词】鼻咽肿瘤；微小RNA216b；蛋白激酶Ca；细胞增殖；细胞侵袭 miR·216b cell andinvasion PKCdin carcinoma suppressesproliferation bytargeting nasopharyngeal and cellsDENG Z矗i—min．Cancer Cancer Min，ⅡU弦廊ng，GUYi一算啪，ZHENGGuo-pei，HE Hospital Research Medical 51DD妨．吼ina Institute．GuangzhouUniversity，Guangzhou author：HE CorrespondingZhi—min．Email：hezhimin2D町@yahoo．com ToelucidatewhethermiR-216b cell andinvasion 【Abstract】0bjective suppressesproliferation by7 torevealthemolecularmechanismthatmiR-216bfunctionsasa tumor in PKCOt．thus targeting suppressor 3’UTR．1uciferasevectorwasconstructedanddual． carcinoma(NPC)．MethodsPKCot nasopharyngeal 1uciferase was toexaminetheeffectofmiR．216bonluciferase reportergeneassay employed activity． cancerCNE2cellsweretransfectedwithmiR-216b th