RNAi抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响.pdfVIP

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2017-09-08 发布于湖北
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RNAi抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响.pdf

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94 中国肿瘤临床2014年第41卷第2期 Chin J Clin Oncol 2014,Vol.41,No.2 · · 基础研究 RNAi抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响 ① ② ① ③ ④ 纪华余巍陈宏李光辉王东林构建针对PIAS3的RNAi质粒载体，初步探讨抑制PIAS3表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响。构摘要目的：方法：建3个RNAi载体，用脂质体法将其转染胶质瘤细胞系CHG-5，通过半定量RT-PCR筛选干扰效率最高的重组RNAi质粒。将该 RNAi质粒转染体外培养的人胶质瘤U251细胞株，用半定量RT-PCR和Westernblot检测PIAS3的表达。AnnexinV2FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡，流式细胞术检测细胞增殖周期变化。转染干扰质粒的细胞株PIAS3基因和蛋白表达均有减结果：弱。流式细胞仪分析，抑制PIAS3表达能够诱导胶质瘤U251细胞拮抗凋亡（P0.01），同时出现细胞周期改变，表现为G2期细胞比例升高，S期细胞比例降低，具有显著性差异（P0.05）。下调PIAS3基因表达使U251阻滞在G期，拮抗细胞凋亡。结论： 2 关键词 PIAS3 RNAi 胶质瘤细胞周期凋亡 doi:10.3969/j.issn.1000-8179.2014 Effects of PIAS3 silencing by RNAi on the proliferation and apoptosis of U251 glioma cells in vitro 1 2 1 3 4 Hua JI , Wei YU , Hong CHEN , Guanghui LI , Donglin WANG Correspondence to: Hong CHEN; E-mail: hongchen2000@ 1Department of Oncology and 2 Department of Pharmacy, Kunming General Hospital of Chengdu Military Command, Kunming 650032, China; 3 Department of Oncology, Xinqiao Hospital Affiliated to Third Military Medical University; 4 Department of Med- ical Oncology, Chongqing Cancer Hospital, Chongqing 400037, China Abstract Objective: To observe the effect of the proteininhibitor of activated STAT 3 (PIAS3) on the proliferation and apopto- sis of U251 glioma cells after PIAS3 expression was inhibited by RNAi. Methods: Three RNAi exp