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物理·生物·技术·
RNA干扰抑制STAT,基因表达对食管癌
细胞放射生物效应影响
李曙光祝淑钗刘志坤 王巍 陶晓哲
【摘要】 目的利用RNA干扰技术抑制人食管癌细胞(ECAl09)信号转导与转录活化因子1
(STAT。)基因表达,观察其对放射敏感性和细胞周期影响。方法针对基因STAT,设计构建干扰质
粒pSTAT.一shRNA,与慢病毒包装质粒混合后共同转染293T细胞,收集病毒液感染ECAl09细胞。采
用RT—PCR和蛋白印迹法测定STAT.在mRNA水平和蛋白水平的表达,采用克隆形成实验和流式细
胞术检测ECAl09细胞放射敏感性和周期分布。结果空白对照、转染阴性、转染阳性细胞的D。值分
别为2.98、3.02、2.03,SF2分别为0.88、0.88、0.83,D。值分别为1.39、1.57、1.20。4Gy照射后12、
3%:22.03%:
24、48h转染阳性细胞比空白对照和转染阴性细胞的G。+G。期比例增高(34.1
:27.97%:27.93%,F=16.86、26.62、40.34,P=0.003、0.001、0.000)。结论RNA干扰不影响
ECAl09细胞的增殖活性,可能是通过调节照射后细胞周期分布来增加放射敏感性。
【关键词】 核糖核酸干扰; 信号转导与转录活化因子; 放射敏感性; 细胞周期; 细胞系,
食管肿瘤
E仃ectofRNAinterferenceof on andcell of
STATlexpression
radiosensitivitycycleesophageal
carcinomalineEcal09LI
cell Xiao—
Shu—guang+,删UShu—chai,LIUZhi—kun.吼ⅣG耽i.附0
Radiation Hebei
of Medical 0500j
zhe.*DepartmentOneology,FourthHospitalof 1.
University、Shijiazhuang
China
author:Z日UShu.chai,Email:$czhu@heinfo.net
Corresponding
Toinhibitthe of transducerandactivatorof
【Abstract】Objective geneexpression
signal
factor human cellcarcinomacelllineEcal09RNA
transcriptionl(STATl)inesophagealsquamous by
interferenceand itseffectonthe andcell ofEcal09cells.Methods
investigate radiosensitivitycycle
Interference for
vector was andconstructed
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