血清、生殖激素和谷胱甘肽对水牛卵母细胞成熟及发育潜能的影响.pdfVIP

云南农业大学学报　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＹｕｎｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１３，２８（Ｓ１）：６５－７５ ｈｔｔｐ：／／ｘｂｙｎａｕｅｄｕｃｎ ＩＳＳＮ１００４－３９０Ｘ；ＣＯＤＥＮＹＮＤＸＡＸ Ｅｍａｉｌ：ｘｂ＠ｙｎａｕｅｄｕｃｎ ＤＯＩ：１０３９６９／ｊｉｓｓｎ１００４－３９０Ｘ（ｎ）２０１３ｚ１０１５ 血清、生殖激素和谷胱甘肽对水牛卵母细胞 成熟及发育潜能的影响 １ １ １ １，２ 丁爱军 ，贾银海 ，王姝瑭 ，苏　雷 （１云南中科胚胎工程生物技术有限公司，云南 昆明６５０２１７； ２中国科学院 昆明动物研究所，云南 昆明６５０２２３） 摘要：以屠宰场获取的废弃的水牛卵巢为试验材料，利用抽吸的方法收集卵母细胞进行体外成熟培养、体外 受精及早期胚胎培养，研究了不同浓度的血清ＦＢＳ，生殖激素 （ｏＦＳＨ，ｏＬＨ，Ｅ，Ｐ）及谷胱甘肽 （ＧＳＨ） ２ ４ 对水牛卵母细胞成熟和早期胚胎发育的影响，并进一步研究水牛卵母细胞成熟培养系统。试验结果表明： （１）以ＴＣＭ１９９培养液为对照组，添加不同浓度血清 ＦＢＳ试验组水牛卵母细胞成熟率 （４２１％，５１７％， ５１１％，５１６％）明显高于对照组 （２９２％）（Ｐ＜００１），其中添加１０％浓度血清ＦＢＳ比较经济合理。（２） 以ＴＣＭ１９９＋１０％ＦＢＳ培养液为对照组，添加不同浓度激素 ｏＦＳＨ试验组水牛卵母细胞成熟率 （５６７％， ６２２％，６１１％，６１９％）和卵裂率 （４６４％，５７７％，５９７％及６１５％）明显高于对照组 （Ｐ＜００５），试 验组 （００１０，００１５，００２０ｕ／ｍＬ）的８ｃｅｌｌ率 （２４１％，２６６％，２６１％）明显高于对照组 （Ｐ＜００１）。 其中添加ｏＦＳＨ浓度为００１０ｕ／ｍＬ效果最好。（３）以ＴＣＭ１９９＋１０％ＦＢＳ为基础培养液，添加不同浓度激素 ｏＬＨ试验组水牛卵母细胞成熟率、卵裂率及８ｃｅｌｌ率与对照组比较，差异不明显 （Ｐ＞００５）。（４）以ＴＣＭ１９９＋ １０％ＦＢＳ培养液为对照组，１７Ｅ 试验组 （１０ ｇ／ｍＬ）对水牛卵母细胞成熟率、卵裂率及 ８ｃｅｌｌ率 β ２ μ （６７４％，５３２％，２９６％）明显高于对照组和其他试验组 （Ｐ＜００５）。（５）以ＴＣＭ１９９＋１０％ＦＢＳ培养液为 对照组，Ｐ试验组 （０６ ｇ／ｍＬ）与对照组对水牛卵母细胞成熟率、卵裂率及８ｃｅｌｌ率没有差异，而试验组 ４ μ （０９，１２，１５ ｇ／ｍＬ）对水牛卵母细胞成熟率 （４２５％，４２０％，４３１％）明显低于对照组 （５１７％） μ （Ｐ＜００１）。（６）以ＴＣＭ１９９＋１０％ＦＢＳ培养液为对照组，添加不同浓度抗氧化剂ＧＳＨ试验组水牛卵母细胞成 熟率、卵裂率、８ｃｅｌｌ率、桑葚率及囊胚率明显高于对照组 （Ｐ＜００５）。（７）水牛卵母细胞成熟培养液最佳 组合方案为：ＴＣＭ１９９＋１０％ＦＢＳ＋００１０ｕ／ｍＬｏＦＳＨ＋１０ ｇ／ｍＬ１７Ｅ＋２０ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ。 μ β ２ 关键词：卵母细胞；体外成熟；水牛 中图分类号：Ｓ８２３８３３５　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００４－３９０Ｘ（２０１３）Ｓ１－００６５－１１ ＴｈｅＥｆｆｅｃｔｓｏｆＳｅｒｕｍ，ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＨｏｒｍｏｎｅａｎｄ ＬｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＲｅｄｕｃｅｄｏｎＭａｔｕｒａｔｉｏｎａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｃｏｍｐ