血管组织工程研究进展.DOCVIP

临床医学论文-血管组织工程研究进展 【关键词】血管?组织工程 ????? 组织工程的概念是美国科学基金会于1987年提出的，是综合应用生命科学和工程学的原理，研制并开发出组织、器官的替代物以解决组织缺损和器官损伤的修复和重建问题。血管组织工程是指利用血管壁的正常细胞和生物可降解材料来制备、重建和再生血管替代材料的科学。目前国内外已经进行了较多的研究以期研制出无免疫原性、抗血栓形成、组织和细胞相容性高、具有一定强度和生长性并能广泛应用于临床的血管替代物，以解决临床上治疗血管狭窄或闭塞导致的缺血性疾病自体血管移植中血管来源有限的问题［1］。 ??? 血管组织工程的研究内容主要包括三个方面：①种子细胞的研究；②细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）替代物的研究；③组织工程血管（tissue engineered tissue）三维培养的研究。 ??? 1? 种子细胞的研究 ??? 血管组织工程所应用的种子细胞包括内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞。内皮细胞覆盖于血管的内表面，呈单层排列，并能分泌多种血管活性因子如内皮素、前列腺素、NO等，具有抑制血小板聚集、抗血栓形成及抗内膜增生的作用［2］，从而保持血管的稳定性。内皮细胞在人［3］和动物［4］的血管移植物模型中已显示出提高血管通畅率的能力。因此，内皮细胞是血管组织工程中最重要的种子细胞。 ??? 1.1? 血管壁细胞? 自体血管壁细胞具有无免疫原性，在体外进行培养、扩增后广泛应用于组织工程血管的研究。其来源主要有以下几个：①自体非必须的血管（如大隐静脉）；②腹膜或皮下脂肪组织（如微血管内皮细胞）。自体血管壁细胞的获取是一种机体侵入性操作，尤其是动脉的获取对机体危害更大，自体静脉位置表浅，取材相对方便。Schnell等［5］做了在心血管组织工程中大隐静脉与主动脉组织作为种子细胞的比较研究，结果显示大隐静脉平滑肌细胞具有良好的活性及增殖能力，经培养种植于生物可吸收支架后，其胶原的形成和机械特性均优于主动脉。但是从体内血管壁中获取的内皮细胞量不多，在体外培养过程中生长缓慢，且传代5~8代后迅速发生衰老。Pasic［6］用网膜脂肪来源的微血管内皮细胞进行动物试验，证实可明显提高血管通畅率，减低内膜增生，这种方法短期内可获得足量的细胞数，但不易纯化且抗血流应力差。采用自体内皮细胞作为种子细胞还存在经过传代扩增、鉴定等程序后种植于组织工程血管上需要较长的时间等问题，如何便捷有效的获取种子细胞，是影响血管组织工程临床应用的一个重要问题。 ??? 1.2? 干细胞? 干细胞是一种未分化的、能够自我复制的原始细胞，具有高度分化增殖能力，可以在一定条件下，分化成各种组织细胞如内皮细胞等。因此，干细胞有可能是血管组织工程最理想的种子细胞。按其来源，分为胚胎干细胞和外周干细胞。胚胎干细胞培养技术复杂、涉及一系列伦理道德问题，临床应用困难，因而外周干细胞作为组织工程血管种子细胞的研究成为研究热点。 ??? 1.2.1? 内皮祖细胞（endothelial progenitor cell,EPC）? 内皮祖细胞又称血管母细胞，是来源于骨髓，并能在体内循环、增殖并分化为成熟EC的前体细胞。Asahara［7］等在体外将CD34+细胞诱导分化成血管内皮细胞，并证明在体内具有形成新生血管的能力。He［8］等成功用EPC作为种子细胞在动物实验中构建血管。Matsumura［9］等将EPC接种到生物可降解支架上，并移植入犬的下腔静脉，结果EPC在犬体内分化成内皮细胞和平滑肌细胞。脐血、骨髓、外周血均能分离出EPC。但是EPC的鉴定方法目前尚缺乏统一标准，可用CD34、VEGF2、CD133作为特异性标记筛选EPC［10］，且来源较少，在一些特定的病理条件下，其表型会发生改变，生物学活性下降。 ??? 1.2.2? 骨髓基质干细胞（mesenchymal stem cells,BMSCs）? 骨髓基质干细胞（BMSCs）是骨髓中中胚层来源的未分化细胞，具备分化为成骨细胞、肌细胞、血管内皮细胞等多种组织细胞及高增殖的潜能。进行组织工程研究有以下优势：①取材方便；②对供体健康无害；③体外扩增能力强、不易丢失细胞表型、来源广泛、分离培养容易、不存在免疫排斥［11~13］；④不存在组织配型的问题。因此骨髓基质干细胞易于临床应用，有望成为组织工程中最理想的种子细胞。 ??? 1.2.3? 胚胎干细胞（embryonic stem cells，ES） 胚胎干细胞是来源于囊胚的内细胞团，具有自我更新和无限增殖的能力。有经诱导后分化形成一个成熟个体中所有类型细胞的潜能［14］。在体外能在合适的培养条件下分化为EC及SMC［15、16］。Lenvenberg等在2002年将人的胚胎干细胞成功地诱导出内皮细胞，内皮细胞