咪唑类离子液体对哺乳动物细胞毒性作用及其机理研究.pdf

摘要 离子液体是指在室温或室温附近温度条件下，仅由离子所组成的液体。离子液体的 种类非常多，具有许多优良的性质，液态离子液体有较大的稳定温度范围；蒸汽压极小； 不易燃；对大量无机和有机物质都表现出良好的溶解能力、较强的催化活性和较高的导 电性等。因此在分离过程、化学反应和电化学等研究领域具有广泛的应用和发展前景。 虽然离子液体被称为新型“绿色溶剂”，但是其“绿色”也是相对的。在生产、使用等过程 中，离子液体也可能会流失到水环境中去，对水体造成污染。离子液体毒性的研究已有 一些报道，如离子液体对高等动植物、低等动植物、微生物的毒性。此外，在分子、细 胞水平上，有的学者也进行了少量的毒性试验研究。但这些研究工作远远滞后于离子液 体的物性及应用研究。 本研究选用了最稳定和应用最广泛的咪唑类离子液体作为研究对象，探讨了咪唑类 研究了离子液体毒性的细胞和分子机制。 离子液体对PCI2细胞具有明显的毒性，而且我们发现不同浓度、不同碳链长度的 h-ECso相比，二者相差约400倍，这说明离子液体的细胞毒性主 【C12mim][Br]的24 mM h．ECso存在一定的差异，其数值的大小在O．1．1．0 (PCI2、EMT6、QGY一7701)的24 之间，说明不同细胞株对离子液体毒性的敏感性不同。 本文还观察了离子液体处理后细胞形态学方面的改变，结果表明，不同浓度的 h，细胞逐渐变小、变圆，细 【Csmim][Cl】(O．07、O．14、0．28mM)对PCI2细胞作用24 胞贴壁能力下降；细胞核逐渐趋于边缘化，细胞核变小，形状不规则，呈现月牙状。形 胞凋亡，并且随着离子液体浓度的增加，凋亡率升高。 O．28 raM)对PCI2细胞染毒24 伤，引起了细胞膜通透性的增高。线粒体膜电位检测试剂JC—l染色结果表明，经 果表明[Csmim][Cl】促进了PCI2细胞MPTP的开放。 mrV0对 度逐渐增加。 本文还检测了离子液体处理后，细胞内的活性氧(ROS)以及抗氧化系统的反应。 h，检测了细胞内ROS的水 [Csmim][Cl】(O．07、O．14、O．28mM)对PCI2细胞染毒24 h后，能够诱导细胞产生过量的ROS；抑制 表明，[Csmim][Cl】处理PCI2细胞24 果说明ROS介导的氧化应激参与了[Csmim][C1】诱导的细胞凋亡 mM) 对PCI2细胞染毒24 AM)检测了细胞内Ca2+的水平， h，用Ca2+荧光探针(Fluo．3 含量显著增加，浓度为0．28 h后，与对照相比， mM的[Csmim][Cl】处理PCI2细胞24 含量显著下降。浓度为O．28 h后，细胞内的 mM的【Csmim][Cl】处理PCI2细胞24 ATP几乎消耗殆尽。该结果说明，细胞内Ca”浓度的增加、钙稳态失调，ATP耗竭， 凋亡相关蛋白的异常表达，是【Csmirn][Cl】引起细胞凋亡的重要原因。 总之，咪唑类离子液体具有细胞毒性，其毒性大小主要取决于阳离子。离子液体细 胞毒性的机制可能是，离子液体造成细胞膜通透性的增加、引起线粒体功能障碍；引发 细胞内Car浓度增加、ATP水平下降；导致ROS升高、以及引起细胞的氧化应激、 膜脂和DNA损伤，引起凋亡