木麻黄属的DNA条形码鉴定研究.pdfVIP

世界科学技术一中医药现代化★专题讨论之一：中药资源与鉴定 摘 要：为验证 DNA条形码序列在物种鉴定方面及物种的系统发育方面的广适性，本研究以黎 药植物木麻黄为研究对象，收集木麻黄及其近缘种和混伪品22份样本，采用4对引物 (ITS，ITS2， trnH-psbA，rbcL)分别进行 PCR扩增 ，产物进行双向测序。利用CodonCodeAligner软件进行序列的拼 接，采用MEGA5．1进行数据的处理。结果表明，利用 ITS／ITS2可以区分木麻黄与其近缘种以及混伪 品，样品的psbA—trnH，rbcL和 ITS／ITS24个序列 中，ITS／ITS2序列具有明显的DNAgap。基 于 ITS／ ITS2序列构建的NJ树结果表 明，木麻黄属所有样品聚为一类，呈现明显的单系性，与其亲缘关系较 近的是藤黄科。因此，ITS／ITS2序列可以准确鉴定黎药的基原植物。并能从分子水平揭示木麻黄的系 统演化规律 。 关键词：木麻黄 ITS／ITS2 物种鉴定 系统发育 doi：10．1l842／wst．2013．03．O11 中图分类号：R282．5 文献标识码 ：A 木麻黄 (Ca8uaginATl,equisetfioliaLinn．)是一种重 松 (Baeckeafrutescens)。 要的黎药植物 ，黎药名雅担风 ，具有温寒行气 ，止咳 其次 ，木麻黄的分类地位一直存在争议 ，被子 化痰的功效 。黎族人用枝叶煎汤内服治疗疝气 、慢 植物起源的假花学说认为 ，木麻黄是由裸子植物的 性咳嗽。目前开发出来的产品有木麻黄浸膏，复方 麻黄类直接演化而来的，故认为其分类地位应该列 木麻黄片。海南野生的木麻黄有两个种 ，分别是细 入到裸子植物中 【；而真花学说认为木麻黄的花的 枝木麻黄 (C．cunninghamianaMiq．)和木麻黄 (C． 结构虽然也是柔荑花序 、单性花 ，但认为是由金缕 equisetifoliaLinn．)。而作为黎药使用的是木麻黄 ，其 梅亚纲次生演化的结果 ，与裸子植物有很大的差 混伪品包括木麻黄的近缘种、裸子植物中的马尾松 异。因此将木麻黄归类为被子植物，单独一个木麻 (P／nusmassoniana)、肯氏南洋杉 (Afail．ariacunning- 黄科[2I。为此 ，我们开展了针对木麻黄及其混伪品的 hamii)、南亚松 (Pinusfinlaysoniana)，桃金娘科 的岗 DNA条形码鉴定研究，探索在分子水平上进行黎药 的标准化鉴定 ，并通过与相关科属的分子 比对 ，探 收稿 日期 ：20l3一O5—24 修 回日期：2013—06—04 索木麻黄的分类地位及其系统演化规律。 ★ 海 口市科技工业信息局重点科技项 目(2011—伽 36)：黎药的DNA条形码研究，负责人：唐历波。 ★★ 通讯作者：唐历波，副教授 ，主要研究方向：植物资源学。 [0 ScienceandTechnology／ModernizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica] 397 2013 第十五卷 第三期 -kVo1．15No．3 DNA条形编码 3【I4]或称 DNA条形码技术 (DNA 并且认为利用COI基因从分子演化的角度，将提供 barcoding)是利用标准的、具有足够变异的、易扩增 快速 、简便 、可信的分类方法。 且相对较短的DNA片段在物种种 内的特异性和种 一 、 材料与方法 间的多样性而创建的一种新的生物身份识别系统 ， 它可以对物种进行快速 的自动鉴定。理想 的DNA 1． — 条形码应该具备以下几个标准 5【11：种间具有明显的 下列材料于 2012年 11月采集 自海南儋州两 遗传变异和分化，并且种内具有足够小 的变异片