不同类型热休克蛋白在大肠癌中的表达及其意义.pdfVIP

不同类型热休克蛋白在大肠癌中的表达及其意义.pdf

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中 文 摘 要 前 言 一\补休克蛋白(HeatShockProteins,HSP)是在生理应激与病理 状态等环境因素的刺激下在细胞内诱导合成的,按其分子量分为 不同类型,显示特定表达位置和生理功能。 HSP与具有不同功能的多种蛋白质在细胞中形成复合体,并 通过其形成和解离而参与有关蛋白质的折叠,亚基的形成、细胞内 的运输及降解等过程,从而调节靶蛋白的活性和功能,但又不参与 靶蛋白的组成,因此HSP又被认为是 “分子伴侣”(Molecular Chaperone) 近年 HSP与肿瘤细胞关系密切,通过与原癌基因和抑 癌基因及基因产物的相互作用来调节肿瘤细胞的增殖。肿瘤细胞 具有无限增殖能力。肿瘤细胞的不断增殖,需要大量的HSP作为 “分子伴侣”来调节和稳定这一异常增殖过程。文献中报导HSP 在许多肿瘤中均有高表达凉孵L腺癌、肺癌、卵巢癌、神经母细胞癌 等,且在部分肿瘤中表达的量与恶性程度及转移、预后有关。 而各类型的HSP在大肠癌中的表达及意义,国内尚未发现相 关文献报导。国外文献亦报导较少。不同类型的HSP在大肠肿 瘤中的表达情况及与肿瘤的发生、发展及预后判断,尚不十分清 楚,故探讨HSP在大肠癌中的表达及与肿瘤的发生、发展及预后 判断浮一分重要的意义。 一f本实验应用免疫组化方法测定40例大肠癌组织及癌旁正常 粘膜组织的HSP的表达情况,并探讨其与大肠癌的发生、发展、预 后及生物学行为的关系。 ·1 · 实验材料 随机收集1999一2000年大肠癌患者标本存档蜡块40例,其 中32例选自于中国医科大学附属第二临床医院内窥镜中心,应用 PENTAXEC-3840肠镜取材的病例标本。8例选自沈阳市第四 人民医院外科大肠癌手术后标本。40例标本分为两组,一组为大 肠癌组织取材标本;另一组为同一大肠癌患者距癌组织10一15厘 米正常癌旁粘膜组织取材。40例患者中,男23人,女17人,年龄 31一86岁,平均59.412.74。其中直肠癌22例,结肠癌18例,所 有病例均经病理学证实诊断为大肠癌患者。所有病例均未接受术 前放疗、化疗。 实验方 法 一、实验试剂 产品编号BM0364热休克蛋白60(LK一1),小鼠抗人; BM0368热休克蛋白70;BA0369热休克蛋白90(x,山羊抗人。以上 产品均为Sigma公司产品,购于武汉博士德公司。 二、实验仪器 莱卡2135病理切片机,德国莱卡公司制造,德贝(DERBY)4 度冷藏冰箱,中国青岛德贝冰箱厂制造。日本OLPYOUSCH- B145一T-2显微镜,日本OLPYOUS公司制造。染色缸数11, 三、标本制做 取存档蜡块80例(癌组织和癌旁正常粘膜组织各40例)用 莱卡2135病理切片机进行连续切片,厚4P,m,常规HE染色。 四、实验检测方法 采用免疫组织化学SABC法进行测定,光镜下观察。 五、结果判断及数据处理 根据阳性细胞占切片内全部肿瘤细胞或正常粘膜细胞的比例 将其分为(1)没有发现阳性细胞为(一);(2)阳性细胞25% (+);(3)阳性细胞占25%一75%为(+十);阳性细胞75%为 (十++)。统计学处理采用r检验及Fishers检验。 实验 结 果 一、不同类型热休克蛋白表达的定位及阳性率。 大肠癌组织经免疫组化染色后,阳性颗粒呈浅黄色到棕黄色。 分别呈弥漫细颗粒状和弥漫粗颗粒状。三种HSP阳性表达产物 大多数位于胞浆,呈灶性或弥漫性阳性,仅4例呈胞浆与胞核同时 染色。癌旁正常粘膜三种HSP仅少数细胞呈低水平表达,HSP60, HSP70,HSP90。在癌组织中阳性率分别为57.50%,62.50%,80. 00%,而癌旁正常组织三种HSP的阳性表达率分别为17.50%a, 12.50%,20.00%。三种HSP在癌组织中阳性表达率与在癌旁正 常粘膜组织中阳性表达率均有显著性差异(P0.01),而HSP90a 与HSP60在癌组织中阳性表达率亦有显著性差异(P0.0

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